豬皮明膠酶解制劑對骨密度影響的研究.pdf

1、我國豬皮明膠資源非常豐富，明膠由18種氨基酸組成，由于其不含脂肪及膽固醇，且具有多樣保健功能，越來越多地受到各學(xué)科的關(guān)注。我國居民膳食中鈣攝入量整體不足，將嚴(yán)重影響國民體質(zhì)。本實驗旨在對豬皮明膠水解工藝及豬皮膠原多肽與鈣的螯合工藝進行探究，制備一種補鈣效果好、且可促進骨膠原形成的膠原多肽補鈣劑。
　　采用豬皮明膠為原料，選用五種蛋白酶于各酶的最適條件下水解豬皮明膠，并以酶解產(chǎn)物中羥脯氨酸的生成量作為評價指標(biāo)。通過試驗研究得知，水解

2、液中羥脯氨酸含量最高的為SG蛋白酶，GW蛋白酶次之，然后依次是中性蛋白酶、堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶。因此，選取SG蛋白酶進行隨后的試驗。以水解后羥脯氨酸含量為指標(biāo)，采用SG蛋白酶進行單因素試驗和正交試驗。結(jié)果表明：在酶添加量為0.05g/g、水解溫度45℃、水解時間4.5h、pH值為3.0的條件下，所得羥脯氨酸含量最高。
　　以豬皮明膠酶解所得豬皮膠原多肽和葡萄糖酸鈣為原料，膠原多肽與鈣的螯合率為指標(biāo)，在一定條件下制備多肽螯合鈣。通

3、過Plackett-Buiman(PB)和中心組合試驗，考察豬皮膠原多肽/水的料液比、膠原多肽/葡萄糖酸鈣的質(zhì)量比、pH、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間、攪拌速度、攪拌時間等因素對豬皮膠原多肽螯合率的影響。試驗確定最佳螯合條件為：膠原多肽/水料液比1.5:100，反應(yīng)溫度60℃，攪拌速度30r/min，攪拌時間20min，膠原多肽/葡萄糖酸鈣質(zhì)量比5.5:1，pH6.0，反應(yīng)時間130min，所得膠原多肽與葡萄糖酸鈣的螯合率可達(dá)78.3％。采用 X

4、-射線衍射方法對豬皮膠原多肽和豬皮膠原多肽螯合鈣進行測試，結(jié)果表明豬皮膠原多肽與鈣形成了一種新的螯合物。
　　對實驗室制備的豬皮膠原多肽螯合鈣增加雌性SD大鼠骨密度的效果進行研究。將斷乳雌性4周齡SD大鼠隨機分為7組，喂養(yǎng)低鈣基礎(chǔ)飼料，同時分別經(jīng)口灌胃蒸餾水、不同劑量膠原多肽螯合鈣和碳酸鈣等受試物。大鼠灌胃第4周做3天鈣代謝試驗，從而得出大鼠的鈣表觀吸收率。大鼠飼養(yǎng)過程中，測定各組大鼠的體重和身長，計算每組大鼠體重和身長增加率。大

5、鼠灌胃3個月后處死，剝離大鼠股骨，測定大鼠股骨的長度、干重、骨密度和骨鈣含量等指標(biāo)，通過場發(fā)射掃描電鏡觀察大鼠股骨表面變化。結(jié)果顯示：20倍劑量多肽螯合鈣組大鼠的體重增加率、身長增加率、股骨質(zhì)量、骨鈣含量和骨密度都顯著高于大鼠低鈣對照組；10倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率和骨密度顯著高于大鼠低鈣對照組。20倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率、股骨質(zhì)量、骨密度和骨鈣含量都顯著高于大鼠相應(yīng)劑量碳酸鈣組；10倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率和