附子理中湯灌腸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎脾腎陽(yáng)虛型大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB血清IL-8表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察附子理中湯對(duì)脾腎陽(yáng)虛型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB血清IL-8表達(dá)的影響，探討附子理中湯保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽(yáng)虛型）的可能機(jī)制，為溫腎健脾法治療潰瘍性結(jié)腸炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：①造模：在前期研究的基礎(chǔ)上制備潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽(yáng)虛型）大鼠模型。②治療：把復(fù)制成功的潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽(yáng)虛型）模型42只SD雄性大鼠隨機(jī)分為5組，分別為模型對(duì)照組10只，西藥對(duì)照組、附子理中湯高劑量組、附子理中湯中劑量組和附

2、子理中湯低劑量組，每組8只。同時(shí)以8只空白組大鼠作為空白對(duì)照組。分組成功后，分別標(biāo)記為模型組、西藥組、附高組、附中組、附低組以及空白組?？瞻捉M與模型組都給以生理鹽水灌腸，3ml/次?天；西藥組以柳氮磺胺吡啶腸溶片混懸液（35mg/ml）灌腸，3ml/次?天；附高組以附子理中湯高濃度混懸液(1.18g/ml)灌腸，3ml/次?天；附中組以附子理中湯中濃度混懸液(0.59g/ml)灌腸，3ml/次?天；附低組以附子理中湯低濃度混懸液(0.2

3、95g/ml)灌腸，3ml/次?天。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每天觀察大鼠的進(jìn)食、大便、形態(tài)、活動(dòng)、毛色等情況，每72h記錄一次體重及肛溫。持續(xù)給藥14天后，將大鼠禁食不禁水24h，用20％烏拉坦10ml/kg腹腔注射進(jìn)行麻醉，后行腹主動(dòng)脈取血，取血量為每只5ml，放入離心機(jī)中以4℃3000r/min離心10分鐘，分離血清后保存于-20℃冰箱中，ELISA法檢測(cè)各組大鼠血清IL-8含量。用頸椎脫臼法處死動(dòng)物，剖開(kāi)腹腔，找到結(jié)腸，自肛門(mén)向上4～10cm范

4、圍內(nèi)取結(jié)腸組織，縱向剪開(kāi)組織，生理鹽水洗凈，平鋪于托盤(pán)內(nèi)，進(jìn)行肉眼觀察。觀察完畢后迅速均分成兩份，一份予10%中性甲醛液固定標(biāo)本，制作病理切片，光鏡下觀察各組大鼠結(jié)腸組織損傷情況，另一份存入-80℃中保存，采用RT-PCR法檢測(cè)結(jié)腸組織中NF-κB含量。
　　結(jié)果：①經(jīng)保留灌腸治療后，附子理中湯各劑量組大鼠的進(jìn)食、大便、體重、形態(tài)、毛色、活動(dòng)及肛溫等一般情況較模型組有所改善。
　?、谌庋奂肮忡R下觀察附子理中湯各劑量組結(jié)腸組織

5、炎癥、水腫、充血情況均輕于模型組。
　?、叟c空白組相比，模型組大鼠腸黏膜炎癥面積和損傷評(píng)分明顯升高，較模型組而言不同劑量附子理中湯組大鼠腸黏膜炎癥面積和損傷評(píng)分明顯下降(P＜0.05);與空白組相比，模型組大鼠腸黏膜NF-κB的含量以及血清IL-8的含量明顯增多(P＜0.05);與模型組比較不同劑量的附子理中湯均能不同程度降低大鼠腸黏膜NF-κB的含量以及血清IL-8的含量(P＜0.05)。
　　結(jié)論：①附子理中湯保留灌腸可