附子理中湯灌腸對潰瘍性結(jié)腸炎脾腎陽虛型大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB血清IL-8表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：觀察附子理中湯對脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB血清IL-8表達的影響，探討附子理中湯保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽虛型）的可能機制，為溫腎健脾法治療潰瘍性結(jié)腸炎提供實驗依據(jù)。
　　方法：①造模：在前期研究的基礎(chǔ)上制備潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽虛型）大鼠模型。②治療：把復(fù)制成功的潰瘍性結(jié)腸炎（脾腎陽虛型）模型42只SD雄性大鼠隨機分為5組，分別為模型對照組10只，西藥對照組、附子理中湯高劑量組、附子理中湯中劑量組和附

2、子理中湯低劑量組，每組8只。同時以8只空白組大鼠作為空白對照組。分組成功后，分別標記為模型組、西藥組、附高組、附中組、附低組以及空白組?？瞻捉M與模型組都給以生理鹽水灌腸，3ml/次?天；西藥組以柳氮磺胺吡啶腸溶片混懸液（35mg/ml）灌腸，3ml/次?天；附高組以附子理中湯高濃度混懸液(1.18g/ml)灌腸，3ml/次?天；附中組以附子理中湯中濃度混懸液(0.59g/ml)灌腸，3ml/次?天；附低組以附子理中湯低濃度混懸液(0.2

3、95g/ml)灌腸，3ml/次?天。實驗過程中每天觀察大鼠的進食、大便、形態(tài)、活動、毛色等情況，每72h記錄一次體重及肛溫。持續(xù)給藥14天后，將大鼠禁食不禁水24h，用20％烏拉坦10ml/kg腹腔注射進行麻醉，后行腹主動脈取血，取血量為每只5ml，放入離心機中以4℃3000r/min離心10分鐘，分離血清后保存于-20℃冰箱中，ELISA法檢測各組大鼠血清IL-8含量。用頸椎脫臼法處死動物，剖開腹腔，找到結(jié)腸，自肛門向上4～10cm范

4、圍內(nèi)取結(jié)腸組織，縱向剪開組織，生理鹽水洗凈，平鋪于托盤內(nèi)，進行肉眼觀察。觀察完畢后迅速均分成兩份，一份予10%中性甲醛液固定標本，制作病理切片，光鏡下觀察各組大鼠結(jié)腸組織損傷情況，另一份存入-80℃中保存，采用RT-PCR法檢測結(jié)腸組織中NF-κB含量。
　　結(jié)果：①經(jīng)保留灌腸治療后，附子理中湯各劑量組大鼠的進食、大便、體重、形態(tài)、毛色、活動及肛溫等一般情況較模型組有所改善。
　?、谌庋奂肮忡R下觀察附子理中湯各劑量組結(jié)腸組織

5、炎癥、水腫、充血情況均輕于模型組。
　?、叟c空白組相比，模型組大鼠腸黏膜炎癥面積和損傷評分明顯升高，較模型組而言不同劑量附子理中湯組大鼠腸黏膜炎癥面積和損傷評分明顯下降(P＜0.05);與空白組相比，模型組大鼠腸黏膜NF-κB的含量以及血清IL-8的含量明顯增多(P＜0.05);與模型組比較不同劑量的附子理中湯均能不同程度降低大鼠腸黏膜NF-κB的含量以及血清IL-8的含量(P＜0.05)。
　　結(jié)論：①附子理中湯保留灌腸可