小膠質(zhì)細(xì)胞不同功能狀態(tài)下MAPK信號(hào)通路變化及梓醇對(duì)其影響.pdf

1、目的：在前期研究工作基礎(chǔ)上進(jìn)一步觀察小膠質(zhì)細(xì)胞不同功能狀態(tài)下MAPK(絲裂原活化蛋白激酶)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化及梓醇對(duì)其影響，探討小膠質(zhì)細(xì)胞功能狀態(tài)變化機(jī)制及梓醇作用機(jī)制。
　　 方法：以BV2細(xì)胞株(小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞瘤)和PC12細(xì)胞株(大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤)為研究對(duì)象，分別用其來(lái)代表小膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元。在不同程度缺氧及有無(wú)梓醇存在條件下培養(yǎng)BV2細(xì)胞，用其培養(yǎng)液培養(yǎng)PC12細(xì)胞，通過(guò)CCK-8法測(cè)定PC12細(xì)胞存活率并以此來(lái)反映BV2細(xì)

2、胞功能，同步應(yīng)用Western b1ot法檢測(cè)BV2細(xì)胞不同功能狀態(tài)下及加入梓醇前后MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路JNK、p38MAPK、ERK1/2蛋白表達(dá)及磷酸化水平。
　　 結(jié)果：1．蛋白表達(dá)量應(yīng)用灰度值來(lái)表示(灰度值與蛋白表達(dá)量成正比)，當(dāng)BV2細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元起保護(hù)作用時(shí)，p-ERK1/2表達(dá)明顯高于p-p38MAPK與p-JNK，其灰度值分別為：0.277±0.010、0.221±0.019和0.163±0.003；當(dāng)BV2細(xì)胞對(duì)

3、神經(jīng)元起損傷作用時(shí)，p-p38MAPK與p-JNK表達(dá)較保護(hù)作用時(shí)進(jìn)一步增強(qiáng)，灰度值分別為：0.398±0.005和0.495±0.050，而p-ERK1/2表達(dá)無(wú)明顯變化，其灰度值為：0.282±0.005。
　　 2．當(dāng)BV2細(xì)胞起保護(hù)作用時(shí)，梓醇可進(jìn)一步增強(qiáng)這種保護(hù)作用，使PC12細(xì)胞存活率進(jìn)一步增加，而使p-p38MAPK(0.125±0.009，P＜0.01)與p-JNK(0.077±0.002，P＜0.01)表達(dá)明顯

4、減低；當(dāng)BV2細(xì)胞對(duì)起損傷作用時(shí)，梓醇則明顯降低了這種損傷作用，并顯著抑制了p-p38MAPK(0.265±0.011，P＜0.01)與p-JNK、(0.304±0.002，P＜0.01)的表達(dá)。梓醇對(duì)p-ERK1/2的表達(dá)無(wú)論是在損傷還是保護(hù)條件下均未見(jiàn)明顯變化(0.279±0.020，P＞0.050；0.283±0.023，P＞0.05)。
　　 結(jié)論：1．小膠質(zhì)細(xì)胞在不同程度缺氧條件下功能狀態(tài)的變化與p38MAPK、JNK