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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究小膠質(zhì)細(xì)胞不同程度低氧下TrKA的表達(dá)及梓醇對(duì)其影響。
方法:以BV2細(xì)胞株代表小膠質(zhì)細(xì)胞,在不同程度低氧及有無(wú)梓醇的情況下對(duì)其培養(yǎng)。應(yīng)用間接免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法、流式細(xì)胞術(shù)及Western-blot法分別對(duì)TrKA蛋白在小膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)進(jìn)行定位、定量及定性研究。免疫熒光法中FITC標(biāo)記的綠色熒光代表TrKA。流式細(xì)胞術(shù)用百分率來(lái)表示TrKA陽(yáng)性細(xì)胞比例。Western-blot法用灰度值來(lái)表示TrKA及pTrKA
2、的表達(dá)量(灰度值與蛋白表達(dá)量成正比)。
結(jié)果:
1.小膠質(zhì)細(xì)胞在常氧培養(yǎng)下其膜上存在TrKA表達(dá),低氧培養(yǎng)1.5hTrKA表達(dá)增加,而低氧培養(yǎng)14h時(shí)TrKA表達(dá)則降低。加入梓醇后使各低氧培養(yǎng)組的TrKA表達(dá)有所增加。
2.小膠質(zhì)細(xì)胞在常氧培養(yǎng)下TrKA陽(yáng)性細(xì)胞比例為82.20±2.34%。低氧1.5h、4h后陽(yáng)性細(xì)胞比例明顯增多(P<0.05),分別可達(dá)87.27±0.42%、89.07±2.
3、57%。隨著低氧時(shí)間延長(zhǎng),TrKA陽(yáng)性細(xì)胞比例顯著下降(P<0.05),低氧8h和14h分別為77.57±0.96%、73.13±2.37%。各低氧培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞加入梓醇后,TrKA陽(yáng)性細(xì)胞比例均有明顯增加(P<0.05),分別為90.63±1.17%、95.87±0.42%、84.07±2.60%、78.73±0.71%。
3.小膠質(zhì)細(xì)胞在常氧培養(yǎng)下有少量pTrKA表達(dá),灰度值是0.94±0.02。低氧1.5h、4hp
4、TrKA明顯增加(P<0.01),其灰度值分別為1.94±0.73、4.58±0.44。隨著低氧時(shí)間延長(zhǎng),pTrKA表達(dá)降低,低氧8h和14h灰度值分別為0.25±0.03、0.17±0.01,較常氧培養(yǎng)下降明顯(P<0.05)。各低氧培養(yǎng)組加入梓醇后pTrKA的表達(dá)均有所升高(P<0.05),灰度值分別為2.18±0.57、8.62±0.53、1.15±0.05、1.37±0.24。
結(jié)論:
1.在小膠質(zhì)細(xì)
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