四種靈芝科真菌和硬柄小皮傘的化學成分及生物活性研究.pdf

1、本論文對靈芝科Ganodermataceae假芝屬Amauroderma廈門假芝(Amaurodermaamoiensis)、雞冠孢芝屬Haddowia長柄雞冠孢芝（Haddowia longipes）以及靈芝屬Ganoderma黃邊靈芝（Ganoderma luteomarginatum）和熱帶靈芝（Ganoderma tropicum）四種野生藥用靈芝及硬柄小皮傘進行了化學成分的分離鑒定及生物活性評價。運用減壓柱層析、反相柱層析、硅

2、膠柱層析、葡聚糖凝膠柱層析等色譜分離技術(shù)，并結(jié)合一維、二維核磁共振技術(shù)以及紅外、紫外、質(zhì)譜等現(xiàn)代波譜技術(shù)，從上述材料中共分離鑒定了單體化合物121個，其中新化合物26個，結(jié)構(gòu)類型涉及三萜、甾體、倍半萜、生物堿等，并對這些天然產(chǎn)物進行了抗腫瘤和神經(jīng)保護等生物活性的研究。本文主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過各種色譜技術(shù)，從廈門假芝子實體乙醇提取物中分離得到25個單體化合物，其中，有兩個新化合物分別為:聚合物amauroamoienin

3、和倍半萜化合物amoienacid。采用MTT法對部分化合物進行了體外抗腫瘤活性測定，發(fā)現(xiàn)4-hydroxy-17-methylincisterol、ergosterol peroxide、(22E,24R)-ergosta-8,22E-diene-3β,5α,6β,7α-tetraol、22E-7α-methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol、1,5-dihydroxy-6'，6'-d

4、imethylpyrano[2'，3':3，2]xanthone和jacareubin對腫瘤細胞表現(xiàn)出抑制活性。采用2種體外抑制酶乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)對部分單體化合物膽堿酶抑制活性篩選結(jié)果表明，(17R)-17-methylincisterol和jacareubin具有兩種膽堿酯酶雙重抑制活性。
　　2.從長柄雞冠孢芝子實體乙醇提取物中分離得到29個單體化合物，其中，有11個新化合物分別鑒定為:11

5、-oxo-ganoderiol D， lanosta-8-en-7，11-dioxo-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy,lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β,24,25,26-tetrahydroxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetylox

6、y-24,26-dihydroxy-25-methoxy,11-oxo-lucidadiol,11β-hydroxy-lucidadiol,lucidone H,lanosta-7,9(11),24E-trien-3β-acetyloxy-26,27-dihydroxy,(22E,24R)-6-methoxyergosta-7，9(11)，22-triene-3β，5α-diol， methyl sinensine E。對部分化合物進行

7、了體外抗腫瘤活性測定，發(fā)現(xiàn)化合物lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β，24，25,26-tetrahydroxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，26-dihydroxy-25-methoxy和11-oxo-lucidadiol對腫瘤細胞表現(xiàn)出抑制活性。A

8、ChE抑制活性篩選結(jié)果表明，11-oxo-ganoderiol D、lanosta-8-en-7,11-dioxo-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β,24,25,26-tetrahydroxy、 lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、11β-hydroxy-luci

9、dadiol、lucidone H、ganoderiol D、lanosta-8-en-7-one-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、 ganodermanondiol、lucidumol B、lucidadiol、lucidadoneA、lanosta-7，9(11)，24E-trien-26-al-3-oxo具有抑制活性，且含有共軛體系O=C7-C8=C9-O=C11的三萜比含有兩個雙鍵的共軛體系C7

10、=C8-C9=C11的三萜抑制活性更強。對2個靈芝生物堿類化合物sinensine D和methyl sinensine E抗炎抗敏相關(guān)活性初步篩選測試結(jié)果表明，兩者對肥大細胞脫顆粒的抑制率分別達到55.06％和51.80％。
　　3.從黃邊靈芝子實體乙醇提取物中分離得到38個單體化合物，其中，有8個新的靈芝三萜化合物，分別為:lanosta-7，9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，25-dihydroxy,la

11、nosta-7,9(11)-dien-24,26-dihydroxy-25-methoxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β,24,26-trihydroxy-25-methoxy, lanosta-8,24E-dien-7-oxo-3β-acetyloxy-26-hydroxy,lanosta-8,24E-dien-7-oxo-3β-acetyloxy-26-al,lanosta-7,9(11),24-trien-3β-

12、acetyloxy-26-hydroxy，methyl Ganoderate A1，methyl Ganoderate A2。對部分化合物進行了體外抗腫瘤活性測定，發(fā)現(xiàn)化合物lanosta-7，9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，25-dihydroxy、lanosta-7，9(11)-dien-24,26-dihydroxy-25-methoxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β,24,26-trihy

13、droxy-25-methoxy、 ganoderiol A、ganoderiol F、lucidumol A、5α-lanosta-7,9(11),24-triene-3β-hydroxy-26-al和calvasterol B對腫瘤細胞表現(xiàn)出抑制活性，且多數(shù)有抗腫瘤活性的化合物具有兩個雙鍵的共軛體系C7=C8-C9=C11的骨架特征。對部分單體化合物AChE抑制活性篩選結(jié)果表明，化合物lanosta-7，9(11)，24-trien

14、-3β-acetyloxy-26-hydroxy、methyl ganoderate A2、ganodermadiol、26-hydroxy-ganodermanondiol具有弱的抑制活性。
　　4.從熱帶靈芝子實體乙醇提取物中的正丁醇部分分離出3個新的靈芝三萜成分，分別鑒定為ganotropic acid，3β，7β，15α，24-tetra-hydroxy-11，23-dioxo-lanost-8-en-26-oic aci

15、d和3β,7β,15α,28-tetra-hydroxy-11,23-dioxo-lanost-8,16-dien-26-oic acid，其中g(shù)anotropic acid的側(cè)鏈上形成了獨特的兩個含氧五元環(huán)。對3個新化合物進行了體外抗腫瘤活性、抗金黃色葡萄球菌以及AChE抑制活性測定，發(fā)現(xiàn)三者均無上述生物活性。
　　5.通過對四種靈芝科真菌的化學成分比較發(fā)現(xiàn)，廈門假芝中不合靈芝三萜類成分，這可能是假芝屬區(qū)分于靈芝屬的重要化學特性

16、。黃邊靈芝和長柄雞冠孢芝的化學成分高度相似，推斷長柄雞冠孢芝和黃邊靈芝具有較近的親緣性，或是由親緣更近的共同祖先類群進化而來，對兩者的ITS4&5序列分析發(fā)現(xiàn)，前者GC含量為48.4％，序列長度為692 bp，后者GC含量為45.9％，序列長度為634 bp。長柄雞冠孢芝中含有靈芝三萜類成分，但未發(fā)現(xiàn)靈芝酸成分，這可能是區(qū)分雞冠孢芝屬與靈芝屬的特征成分。
　　6.從硬柄小皮傘子實體乙醇提取物中分離得到26個單體化合物，其中，有兩個