基于DNA和金納米粒子體系對生物小分子的免標記光度法測定.pdf

1、本文旨在利用DNA和金納米粒子實現(xiàn)對生物小分子的免標記光度法測定，主要包括以下兩個方面的工作:(1)利用谷胱甘肽修飾的金納米顆粒基于靜電效應比色法檢測神經(jīng)元素3(Neurogenin3，ngn3)片段。Ngn3作為神經(jīng)前體細胞分化的關鍵轉錄蛋白因子，在胰島內(nèi)分泌細胞的分化中發(fā)揮著重要作用。在本實驗中，我們對ngn3的多肽片段進行了研究。分散狀態(tài)下的金納米粒子溶液為酒紅色，在紫外吸收光譜中520 nm處有尖銳的吸收峰。谷胱甘肽可以通過Au

2、-S鍵與金納米粒子結合，由于所帶有的負電荷，在一定的鹽濃度范圍內(nèi)，谷胱甘肽能夠保護金納米粒子免受鹽誘導的聚集。當ngn3多肽片段存在時，在一定的鹽濃度下，ngn3片段能夠誘導GSH-AuNPs發(fā)生聚集，使金納米粒子溶液由紅色變成藍色?；诖?，本論文以谷胱甘肽修飾的金納米粒子為探針，建立了快速檢測ngn3片段的比色方法。在優(yōu)化條件下，檢測ngn3的線性范圍為20-300ng/mL，檢出限(LOD)為8 ng/mL，方法具有良好的選擇性。(

3、2)基于pH值誘導i-motif DNA形成的熒光光譜法檢測葡萄糖。在酸性條件下，富含胞嘧啶的DNA鏈中的胞嘧啶會部分質(zhì)子化，質(zhì)子化的胞嘧啶與非質(zhì)子化的胞嘧啶形成C-CH(+)鍵，從而導致DNA的構象由單鏈結構變成剛性的四重折疊結構即i-motif DNA結構。在實驗中，我們使用一條標記有熒光基團和猝滅基團的富含胞嘧啶的DNA鏈作為檢測探針。在加入葡萄糖前，熒光標記的DNA探針會發(fā)出較強的熒光，當加入葡萄糖后，葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用