普洱茶茶色素對SD大鼠脂質(zhì)代謝的影響及其作用機理研究.pdf

1、現(xiàn)代生活方式導致目前肥胖人群的數(shù)量急劇升高。研究顯示，普洱茶具有一定的減肥降脂作用，然而關(guān)于其減肥降脂的作用機制尚未徹底闡明。因此，本課題通過普洱茶茶色素對SD（Sprague dawley）大鼠和HepG2細胞的脂質(zhì)代謝的影響研究其肥降脂作用及其機理。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴采用不同濃度普洱茶茶色素對高脂飼料喂養(yǎng)的正常 SD大鼠連續(xù)干預12周，觀察普洱茶茶色素對大鼠肝臟中甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）含量。結(jié)果表明：普洱

2、茶茶色素降低了高脂大鼠肝臟中TG和TC含量，且呈劑量依賴性。特別是高濃度處理組可使高脂狀態(tài)下大鼠肝臟中TG由0.345 mmol/g到0.160 mmol/g，TC由0.186 mmol/g到0.110 mmol/g，與正常對照組的結(jié)果相近，從而有效的改善大鼠肝臟中脂質(zhì)代謝紊亂。⑵利用MTT法確定普洱茶茶色素作用HepG2細胞的濃度范圍，并通過油酸富集培養(yǎng)構(gòu)建細胞肥胖模型。將 HepG2細胞分為正常培養(yǎng)和油酸誘導培養(yǎng)組，分別予以普洱茶茶

3、色素進行干預，從細胞水平研究普洱茶茶色素對脂代謝的影響。結(jié)果顯示：普洱茶茶色素能顯著降低油酸誘導狀態(tài)下HepG2細胞內(nèi)TG含量，隨普洱茶茶色素濃度增加而減少，在實驗濃度范圍內(nèi)最高能降低50.30％。此外，可降低正常培養(yǎng)下HepG2細胞內(nèi)TG和TC含量和油酸誘導下HepG2細胞內(nèi)TC含量，作用效果呈劑量依賴性但結(jié)果不顯著。同時，油紅O染色結(jié)果顯示普洱茶茶色素作用后，油酸誘導的HepG2細胞內(nèi)脂滴明顯減少。說明普洱茶茶色素能維持肝細胞正常形

4、態(tài)，有效降低脂質(zhì)在肝細胞中的沉積。⑶將HepG2細胞分為正常培養(yǎng)和油酸誘導培養(yǎng)組，分別予以普洱茶茶色素進行干預，檢測普洱茶茶色素對HepG2細胞的丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量及過氧化氫酶（CAT）活力的影響。結(jié)果表明：普洱茶茶色素能有效降低油酸誘導培養(yǎng)的HepG2細胞的細胞外排GSH含量，CAT活力，提高細胞內(nèi)MDA含量，但對正常培養(yǎng)的HepG2細胞的作用效果不明顯。與油酸組相比，400μg/mL普洱茶茶色素作用油酸環(huán)境下的

5、HepG2細胞外排CAT活力和GSH含量分別提高763.23%和134.09%，同時細胞內(nèi)MDA含量降低49.59%。說明普洱茶茶色素對油酸誘導的HepG2細胞有良好的抗氧化作用。⑷利用實時熒光定量PCR（RT-PCR）技術(shù)測定脂肪酸合成酶（FAS）、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（SREBP-1c）、三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運子A1（ABCA1）、膽固醇7α-羥化酶（CYP7A1）、羥基甲戊二酰輔酶A還原酶（HMG-CoA reductase，HM

6、GCR）的mRNA轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果表明：普洱茶茶色素作用12周后大鼠肝臟中FAS、SREBP-1c、HMGCR的mRNA表達水平顯著下調(diào)。普洱茶茶色素作用 HepG2細胞24 h后能顯著下調(diào)油酸誘導下 HepG2細胞的FAS和 SREBP-1c的mRNA表達水平，顯著上調(diào)ABCA1的轉(zhuǎn)錄水平，CYP7A1的轉(zhuǎn)錄水平呈上升趨勢。⑸用Western blot法檢測測大鼠肝臟和HepG2細胞中p-AMPK蛋白的表達水平，結(jié)果表明：普洱茶茶色素能