普洱茶茶褐素中小分子化合物分析研究.pdf

1、黑茶是我國所特有的茶葉種類，是我國六大茶類中一類由不同微生物發(fā)酵的茶葉，屬于后發(fā)酵茶。普洱茶、青磚茶、茯磚茶、康磚茶、六堡茶等均屬于黑茶，普洱茶是其中比較著名的黑茶品種。茶褐素是普洱茶獨特的化學成分。本文以普洱茶茶褐素為研究對象，通過有機溶劑萃取，乙醇分段，柱層析分離，制備色譜分離，對茶褐素主要成分進行分離純化。同時利用LC-MS、1H-NMR手段對各萃取部位進行成分分析。并通過酸堿調節(jié)對普洱茶茶褐素的化學成分進行研究，為進一步闡明茶褐

2、素分子結構提供了依據(jù)。
　　研究結果表明：
　　（1）對普洱茶各萃取組分進行多酚類成分分析發(fā)現(xiàn)，試驗樣品中茶褐素部位未檢測出沒食子酸、表沒食子兒茶素酸酯和表兒茶素，而其含有的可可堿成分明顯高于其它萃取組分，含量高達31.76％；無水乙醇萃取物中，沒食子酸的含量比較高，占21.13%；二氯甲烷萃取物中咖啡堿的含量較高，占7.23%；其它各萃取組分中的多酚類物質的含量都有不同程度的變化。
　　（2）對普洱茶各萃取組分通過1

3、H-NMR分析發(fā)現(xiàn)，無水乙醇部位的成分主要是嘌呤類、生物堿類的物質；二氯甲烷部位發(fā)現(xiàn)了沒食子酸和與氮上相連的氫的化學信號。反映了該部位主要是多酚類物質同時由于咖啡堿不溶于二氯甲烷分層被除去。乙酸乙酯部位的成分主要是一些黃酮類物質；正丁醇部位的成分主要是一些多糖類物質，其中在該部位主要發(fā)現(xiàn)了一簇糖苷類的氫信號。水殘留萃取部位的主要是一類生物堿的信號；茶褐素部位主要是一些糖苷類的氫信號、普洱茶素和苯環(huán)氫信號等。
　?。?）依次通過有機

4、溶劑萃取，乙醇分段可以對茶褐素進行有效地分離以及純化。使用不同濃度的乙醇/水溶液對茶褐素進行分級，其中以水浸出物和50%乙醇/水的得率最高，分別為22.78%和10.53%。對不同濃度的乙醇/水溶液分級得到的茶褐素進行LC-MS分析，結果表明10%乙醇水溶液得到的茶褐素的吸收值普遍高于其他分段產物。
　?。?）酸堿對茶褐素的影響，可以得出在酸調節(jié)的過程中，茶褐素中的蛋白類物質達到其等電點，有沉淀析出。通過LC-MS對茶褐素樣品和p

5、H=1.0條件下的樣品進行成分分析，分析發(fā)現(xiàn)酸化后的茶褐素中具有相同極性的物質在此條件下更穩(wěn)定。因而酸性條件下的茶褐素在其排除沉淀干擾后，使其中一些被掩蓋的物質顯現(xiàn)出來。堿性條件下的茶褐素，因茶褐素主要酸性官能團為酚羥基和羧基。由此，堿性條件
　　會導致茶褐素中的多酚-糖殘基聚合物的穩(wěn)定性降低，物質的組成結構發(fā)生變化。因而該過程中由于物質成分的變化茶褐素的顏色隨pH值的升高而加深。
　　（5）選取茶褐素分級中的20%的乙醇部