苯丙素類酚酸性化合物的配位色譜分析研究.pdf

1、苯丙素類酚酸性化合物藥理活性突出，如丹酚酸等，越來越受到藥學(xué)界的重視。苯丙素類酚酸結(jié)構(gòu)均含有苯丙基(Ph-C-C-C-)，分離特性相似，存在穩(wěn)定性差，檢測(cè)條件苛刻，分離耗時(shí)長等問題，尤其是成分復(fù)雜的多酚酸混合樣品，往往需要梯度洗脫法測(cè)定，與酚酸性質(zhì)相近的雜質(zhì)(如黃酮苷類，同分異構(gòu)體等)干擾現(xiàn)象也很嚴(yán)重。 本文圍繞苯丙素類酚酸色譜分離的關(guān)鍵技術(shù)難題，以典型化合物為對(duì)象，研究其快速配位色譜分離與分析方法。選擇了多種配體，通過計(jì)算機(jī)模

2、擬，化學(xué)計(jì)算和實(shí)驗(yàn)分析探討了目標(biāo)化合物與配體的配位機(jī)理，分析了配體的適用性，總結(jié)了苯丙素類酚酸的配位色譜分離規(guī)律，其研究結(jié)果如下： 1.如果分離測(cè)定一對(duì)常規(guī)方法較難分離的苯丙素類酚酸，要根據(jù)它們結(jié)構(gòu)的差異來選擇相應(yīng)的配位色譜法，現(xiàn)將可能出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)差異分為兩大類：(1)存在支鏈雙鍵差異，(2)存在羧基差異。這種差異是基團(tuán)數(shù)量或位置差異。當(dāng)一對(duì)酚酸分子既有雙鍵差異又有羧基差異的時(shí)候，要根據(jù)分子結(jié)構(gòu)確定哪種差異占主導(dǎo)地位，一般來說優(yōu)先

3、選用硝酸銀配位色譜法。 2.選擇硝酸銀，氯化鈣，硼砂，尿素作為配體，采用ChemBioOffice2008軟件和依據(jù)分子力學(xué)(MM2)能量最小原則，對(duì)6種典型酚酸(丹參素，咖啡酸，菊苣酸，丹酚酸A，丹酚酸B，迷迭香酸)與4種配體配位前后體系的最小總能量進(jìn)行計(jì)算，根據(jù)計(jì)算結(jié)果得到結(jié)論：對(duì)于金屬配體，硝酸銀的配位能力略強(qiáng)于氯化鈣，對(duì)于非金屬配體，硼砂和尿素的配位能力基本相同。幾種配體配位能力強(qiáng)弱順序?yàn)椋篈g+>Ca2+>尿素≈硼砂。

4、 3.當(dāng)一對(duì)酚酸結(jié)構(gòu)差異符合(1)時(shí)，宜采用銀離子雙鍵配位進(jìn)行樣品的色譜分離，配體優(yōu)選硝酸銀。依此，建立了菊苣酸和單咖啡酰酒石酸，丹酚酸B和異丹酚酸B這兩對(duì)酚酸的硝酸銀配位色譜分離方法，硝酸銀的濃度為6～9mmol/L，分離度分別為1.5和2.3。紅外，質(zhì)譜等分析表明，配位是多點(diǎn)(n≥3)聯(lián)合作用，主配位點(diǎn)是雙鍵，同時(shí)受到相鄰苯環(huán)和羰基的強(qiáng)烈影響。 4.當(dāng)一對(duì)酚酸分子結(jié)構(gòu)差異符合(2)時(shí)，宜采用鈣離子羧基配位進(jìn)行樣品的色

5、譜分離，配位劑優(yōu)選氯化鈣。依此，建立了丹酚酸A和B，菊苣酸和洋薊酸這兩對(duì)酚酸的配位色譜分離方法，氯化鈣的濃度為5～8 mmol/L，分離度分別為1.9和1.7。主配位點(diǎn)是分子中的羧基，同時(shí)受到距離最近雙鍵(直鏈雙鍵或苯環(huán)大π鍵)電子云的強(qiáng)烈影響，配位是多點(diǎn)聯(lián)合作用(n≥2)。苯環(huán)影響強(qiáng)于直鏈雙鍵。 5.當(dāng)酚酸樣品的雜質(zhì)具有葡糖基結(jié)構(gòu)，測(cè)定此樣品時(shí)可選用硼砂抑制雜質(zhì)，優(yōu)化測(cè)定效果。硼砂溶解后生成硼酸，硼酸分子能夠與葡糖基同側(cè)三個(gè)或