23603.巰基化合物的色譜分析研究

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名(中英對照)：巰基化合物的色譜分析研究巰基化合物的色譜分析研究Applicationinvestigationofthechromatographicanalysisofthiolcompounds作者姓名：譚小芳譚小芳指導(dǎo)教師姓名：曹麗偉曹麗偉及學(xué)位、職稱：博士博士副教授副教授學(xué)科、專業(yè)名稱：化學(xué)化學(xué)分析化學(xué)分析化學(xué)論文提交日期：2014年5月論文答辯日期：2014年6月2日答辯委員會主席：劉應(yīng)亮劉應(yīng)亮教授教授

2、論文評閱人：學(xué)位授予單位和日期：暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文Ⅰ摘要巰基化合物廣泛地存在于生物體內(nèi)，具有清除自由基、重金屬解毒和拮抗電離輻射等作用。此外，巰基化合物還與機(jī)體生長發(fā)育、延緩衰老及某些疾?。ㄈ绨籽?，關(guān)節(jié)炎和帕金森綜合癥）有關(guān)。巰基類藥物可用于許多種疾病的治療。因此，建立簡單、快速、靈敏的巰基化合物的分析檢測方法具有十分重要的意義。本論文采用毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測法（CELIF）和高效液相色譜熒光檢測法（HPL

3、CFL）分析測定生物樣品中的巰基化合物。研究內(nèi)容主要包括以下三個部分：（1）建立了以BODIPY類熒光染料（1357四甲基8溴甲基二氟化硼二吡咯甲川，TMMBBr）為柱前衍生試劑，采用毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測法同時測定高半胱氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽三種巰基化合物的分析方法。具體考察了電泳背景電解質(zhì)的種類、濃度和pH值、分離電壓、進(jìn)樣時間對分離的影響；研究了衍生緩沖溶液的組成及pH值、衍生試劑濃度、反應(yīng)溫度和時間對衍生效率的影響。在優(yōu)化

4、的條件下，高半胱氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽的檢出限（SN=3）分別為0.73nmolL，0.72nmolL和0.36nmolL。將該方法應(yīng)用于人血清和尿液樣品中的高半胱氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽的測定，回收率在92.6%109.1%之間。此外，嘗試了TMMBBr用于活細(xì)胞內(nèi)的巰基化合物的熒光成像。（2）同時建立了高效液相色譜熒光檢測法和毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測法測定巰基類藥物D青霉胺和硫普羅寧的兩種分析方法。以TMMBBr為熒光標(biāo)記試劑，

5、詳細(xì)探討了電泳及色譜分離條件，D青霉胺和硫普羅寧的衍生條件，確定了方法的可行性。在最優(yōu)條件下，D青霉胺和硫普羅寧均可在12min內(nèi)達(dá)到基線分離，檢出限分別為5.0nmolL，2.0nmolL和0.88nmolL，0.47nmolL。將兩種方法成功應(yīng)用于人尿液和血清樣品中D青霉胺和硫普羅寧的測定，回收率分別在95.0%106.7%和95.2%104.3%之間。（3）建立了毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測法同時測定卡托普利和N乙酰L半胱氨酸兩種藥

6、物的分析方法。以熒光素為內(nèi)標(biāo)物，在25mmolL硼酸電泳緩沖溶液（pH9.5）中，當(dāng)分離電壓為11.0kV時，卡托普利和N乙酰L半胱氨酸的衍生物及內(nèi)標(biāo)物在室溫條件下15min內(nèi)達(dá)到基線分離。在優(yōu)化條件下，卡托普利和N乙酰L半胱氨酸檢測的線性范圍在6600nmolL之間，線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9982和0.9985，檢出限分別為0.65nmolL和0.76nmolL。將該方法成功應(yīng)用于人血清和尿液樣品中卡托普利和N乙酰L半胱氨酸的測定，回