衍生化法測定生物樣品中小分子巰基化合物的研究.pdf

1、谷胱甘肽是生物體內(nèi)重要的小分子巰基化合物，具有清除有害自由基、重金屬解毒等活性功能。篩選富含谷胱甘肽的生物樣品作為人體外源性補(bǔ)充劑或利用其對重金屬的超積累作用修復(fù)重金屬污染，在防病、治病以及在綠色環(huán)保中具有重要意義。本研究改變了傳統(tǒng)的提取方法，利用破壁與衍生化同步進(jìn)行的提取方法，避免了細(xì)胞破壁后巰基的氧化變性。采用UV-Vis分光光度法利用5,5'-二硫硝基苯甲酸（5,5'-dithio-bis-nitrobenzoic acid，DT

2、NB）作為衍生化試劑可以測定生物樣品中小分子巰基化合物的總量。而且利用鄰苯二甲醛（o-phthaladehyde,OPA）作為衍生化試劑可以選擇性測定生物樣品中GSH的含量。本研究采用標(biāo)準(zhǔn)加入法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法分別測定了生物樣品中GSH的含量，利用差減法計算出生物樣品中半胱氨酸的含量。最后利用MALD-TOF質(zhì)譜法對所測生物樣品中的小分子巰基進(jìn)行了定性分析。研究結(jié)果表明生物細(xì)胞中存在完整的谷胱甘肽及半胱氨酸分子。本研究對生物細(xì)胞內(nèi)活性物質(zhì)的