新型包載熒光分子和金顆粒的納米膠束制備及其腫瘤靶向熒光-CT雙模式成像診斷研究.pdf

1、目的：
　　制備一種熒光分子和金顆粒雙載的納米膠束成像制劑，并研究其體內(nèi)腫瘤靶向熒光/CT雙模式成像診斷能力。
　　方法：
　　1、納米膠束M-NPAPF-Au的制備、表征及毒性研究：
　　采用“超聲乳化法”對(duì)納米膠束M-NPAPF-Au進(jìn)行制備；采用激光粒度儀對(duì)納米膠束的粒徑、穩(wěn)定性等進(jìn)行研究；選用三種細(xì)胞株CT26、HepG2和L02，對(duì)納米膠束M-NPAPF-Au的毒性進(jìn)行分析。
　　2、納米膠束M-

2、NPAPF-Au的體外熒光/CT成像效果研究：
　　對(duì)納米膠束M-NPAPF-Au的聚集誘導(dǎo)發(fā)光（AIE）特性進(jìn)行驗(yàn)證；分別采用流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡和熒光光譜成像系統(tǒng)等考察納米膠束的體外熒光成像效果；采用CT掃描系統(tǒng)對(duì)納米膠束的體外CT成像效果進(jìn)行分析。熒光光譜成像系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置如下：激發(fā)波長(zhǎng)488nm，光譜采集波段為660nm~750nm。CT成像系統(tǒng)掃描參數(shù)設(shè)置如下：有效像素大小，50μm；電壓，80kVp，電流，500

3、μA；視野，91.07mm×91.07mm×91.07mm；旋轉(zhuǎn)角度，360度。
　　3、納米膠束M-NPAPF-Au體內(nèi)的腫瘤靶向熒光/CT雙模式成像診斷能力研究：
　　研究納米膠束M-NPAPF-Au在小鼠體內(nèi)的腫瘤靶向熒光成像效果和生物分布情況；測(cè)定納米膠束的血液循環(huán)半衰期；研究納米膠束M-NPAPF-Au在小鼠體內(nèi)的腫瘤靶向CT成像效果和生物分布情況。動(dòng)物模型選用的是荷載CT26腫瘤細(xì)胞的BALB/c雌性小鼠。

4、>　　結(jié)果：
　　1、制備了一種熒光分子（NPAPF）和金納米顆粒雙載的納米膠束成像診斷制劑M-NPAPF-Au，在該膠束體系中，Au/NPAPF/DSPE-PEG2000的最適質(zhì)量配比為1/1/8，納米膠束的平均粒徑約為65nm，DLS結(jié)果顯示其多分散性非常好。該尺寸的納米膠束具有EPR效應(yīng)，有很好的腫瘤被動(dòng)靶向性。M-NPAPF-Au細(xì)胞、動(dòng)物水平上的毒性研究表明：當(dāng)納米膠束的細(xì)胞培養(yǎng)濃度小于600μg/ml時(shí)，其對(duì)細(xì)胞的活力

5、不會(huì)產(chǎn)生明顯的抑制作用；當(dāng)納米膠束注入小鼠體內(nèi)后血液循環(huán)濃度不超過7mg/ml時(shí)，其對(duì)小鼠不會(huì)產(chǎn)生明顯的毒副作用，說明納米膠束M-NPAPF-Au的生物相容性非常好。
　　2、納米膠束M-NPAPF-Au的體外熒光/CT成像研究結(jié)果顯示：在M-NPAPF-Au膠束體系中，熒光分子NPAPF依然保留著其獨(dú)特的聚集誘導(dǎo)發(fā)光（AIE）特性，NPAPF分子的熒光并未被金納米顆粒淬滅，即克服了傳統(tǒng)意義上金納米顆粒對(duì)熒光分子的強(qiáng)烈淬滅作用，從

6、而保證了納米膠束M-NPAPF-Au高效的熒光成像能力。M-NPAPF-Au的體外熒光和CT信號(hào)均非常強(qiáng)，這是該研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重要發(fā)現(xiàn)。
　　3、納米膠束M-NPAPF-Au的體內(nèi)腫瘤靶向熒光/CT雙模式成像診斷研究結(jié)果表明：納米膠束M-NPAPF-Au的體內(nèi)熒光成像和CT成像效果均非常顯著，且M-NPAPF-Au還具有生物相容性好、血液循環(huán)半衰期長(zhǎng)、對(duì)活體的毒性低、腫瘤被動(dòng)靶向性強(qiáng)等諸多優(yōu)勢(shì)。納米膠束M-NPAPF-Au可發(fā)展成