牛心樸子生物堿中殺蟲成分的分離鑒定及殺蟲性研究.pdf

1、牛心樸子(Cynanchum komarovii A(1).Iljinski)隸屬于蘿摩科鵝絨藤屬植物，主要分布于寧夏、甘肅、陜西、內(nèi)蒙古、青海等地。近年來，已有大量關(guān)于牛心樸子化學成分及生物活性方面的研究報道，但關(guān)于牛心樸子殺蟲活性的研究主要還是以粗提物或總生物堿為主，而未對單體生物堿的殺蟲活性進行研究，不清楚具體的殺蟲活性成分。為了確定牛心樸子中具體的殺蟲活性成分，本論文以牛心樸子總生物堿為研究對象，首先對其進行分離，并通過活性跟蹤

2、獲得有殺蟲活性的單體成分，并鑒定其化學結(jié)構(gòu);然后對獲得的單體生物堿的殺蟲活性及作用方式進行研究，分析結(jié)構(gòu)與活性之間的構(gòu)效關(guān)系，并與總生物堿進行比較，更好地掌握牛心樸子生物堿的殺蟲活性特點，為牛心樸子資源的深入開發(fā)和利用提供依據(jù)，同時為新農(nóng)藥創(chuàng)制提供參考。主要研究結(jié)果如下:
　　 ⑴牛心樸子中總生物堿的提取。以總生物堿得率為指標，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗方案，對牛心樸子總生物堿的超聲輔助提取工藝進行優(yōu)化，確定最佳提取工藝

3、條件為:乙醇濃度70％、料液比1∶25(g/mL)、超聲時間50 min、提取溫度60℃。在此條件下，總生物堿得率為0.3741％。各因素對總生物堿得率影響的大小順序為:乙醇濃度＞料液比＞提取溫度＞提取時間。
　　 ⑵牛心樸子地上部分生物堿與地下部分生物堿殺蟲活性比較。以小菜蛾和枸杞蚜蟲為試蟲，對牛心樸子地上和地下兩部分總生物堿的殺蟲活性進行對比研究，結(jié)果表明，牛心樸子地上和地下部分總生物堿對小菜蛾和枸杞蚜蟲均具有較好的觸殺活性

4、，且地上部分生物堿的殺蟲活性略高于地下部分生物堿的活性。
　　 ⑶牛心樸子總生物堿中殺蟲活性成分的分離與鑒定。采用生物活性追蹤和化學分離相結(jié)合的方法，對牛心樸子總生物堿中的殺蟲活性成分進行分離篩選，得到三個具有殺蟲活性的單體生物堿（生物堿1、生物堿2和生物堿3），利用ESI-MS、IR、1H-NMR、13C-NMR、 DEPT等波譜分析手段，并對照有關(guān)文獻，確定這三個單體生物堿分別是antofine、6-O-desmethyla

5、ntofine和6-O-desmethylsecoantofine。
　　 ⑷單體生物堿的殺蟲活性研究及構(gòu)效關(guān)系分析。以小菜蛾和枸杞蚜蟲為目標試蟲，測試了三種單體生物堿的殺蟲活性，結(jié)果顯示，三種生物堿對小菜蛾和枸杞表現(xiàn)出不同的活性，其中生物堿1的活性最高，其次是生物堿2，生物堿3的活性最低。在對小菜蛾的活性作用方式中，以拒食活性最好，其次是觸殺活性和抑制生長發(fā)育活性，胃毒活性較弱。對枸杞蚜蟲主要表現(xiàn)出觸殺活性。和總生物堿的活性相