酶法及離子液體雙水相提取分離菜籽粕蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、　　我國(guó)蛋白資源相當(dāng)有限,而菜籽蛋白作為全價(jià)優(yōu)質(zhì)植物蛋白,若能將大量廉價(jià)的菜籽蛋白轉(zhuǎn)化為優(yōu)質(zhì)食品蛋白源,這將具有重要社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。在傳統(tǒng)水相法的基礎(chǔ)上,酶解法增加了酶水解過(guò)程,能有效提高菜籽蛋白提取率。離子液體雙水相作為一種全新的高效綠色分離體系,具有無(wú)毒、安全、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),備受學(xué)術(shù)界及產(chǎn)業(yè)界的重視。本文以高溫菜籽粕為原料,采用多酶法與堿提酸沉法結(jié)合提取菜籽粕粗蛋白,研究了離子液體/鹽雙水相體系的相行為,并應(yīng)用[Bmim]Cl/

2、K2HPO4體系于從菜籽粗蛋白中分離提純菜籽蛋白,具體研究?jī)?nèi)容如下：
　　(1) 采用多酶解法與堿提酸沉法相結(jié)合的新工藝提取菜籽粕蛋白質(zhì)。考察了不同酶及其用量對(duì)菜籽蛋白提取率的影響,并用L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)化得到了多酶酶解的最優(yōu)工藝條件：多酶為α-淀粉酶與纖維素酶的混合酶,且加入量為纖維素酶45 U/g、α-淀粉酶90 U/g,溫度50℃,pH 9.0,料液比1∶10；在此最優(yōu)條件下的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)所得蛋白質(zhì)提取率為98.96%,

3、蛋白質(zhì)得率為25.37%,粗蛋白產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量為76.50%,形態(tài)為淺黃色無(wú)特殊氣味的細(xì)晶粒及粉末固體；同時(shí)還考察了超聲輔助酶法提取菜籽蛋白質(zhì),且此工藝最優(yōu)條件為：超聲溫度為50℃,超聲時(shí)間為2 h,超聲頻率為100 HZ,超聲方式為均間隙方式操作,蛋白得率為28.56%,產(chǎn)品蛋白含量為82.22%,說(shuō)明超聲輔助酶解法有利于蛋白質(zhì)提取率的提高；
　　(2) 通過(guò)采用濁度法實(shí)驗(yàn)測(cè)定得到了30 ℃下K2HPO4在親水性離子液體1-

4、丁基-3-甲基咪唑氯鹽([Bmim]Cl)水溶液中的溶解度曲線,使用回歸法得到了溶解度曲線經(jīng)驗(yàn)方程并關(guān)聯(lián),關(guān)聯(lián)度較高(相關(guān)系數(shù) >0.99),同時(shí)繪制了[Bmim]Cl/K2HPO4三元體系的相圖,建立了一種測(cè)定[Bmim]Cl/K2HPO4雙水相體系的液液相平衡數(shù)據(jù)測(cè)定方法及實(shí)測(cè)了該體系的相平衡數(shù)據(jù),最后還研究了溫度對(duì)該體系相圖的影響；
　　(3) 建立了[Bmim]Cl/K2HPO4雙水相體系分離純化菜籽蛋白的新方法,考察

5、了在該雙水相體系中離子液體濃度、鹽濃度及蛋白質(zhì)濃度、pH 值對(duì)菜籽蛋白提取率的影響；并通過(guò)L16(45)正交優(yōu)化試驗(yàn)得到了該體系分離純化菜籽蛋白的最佳工藝條件：[Bmim]Cl 濃度為 350 mg/mL、K2HPO4濃度為 150 mg/mL、菜籽蛋白濃度為 70.0 mg/L、pH 6.8。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在此最佳條件下菜籽蛋白的提取率達(dá)到99.1%；
　　(4) 測(cè)定了產(chǎn)品的溶解度、持水性、乳化性與乳化穩(wěn)定性、起泡性與泡