可逆與吸附-包埋固定化酶研究.pdf

1、在缺乏長期穩(wěn)定的工藝條件下，游離酶存在難以回收和重復利用等缺點，因此在工業(yè)中的應用受到了很大的限制。固定化酶解決了游離酶的上述缺點，提供了具有更強的穩(wěn)定性，重復或連續(xù)使用性能較好，容易從反應液混合物中分離出來，同時又預防被微生物污染等優(yōu)點。而載體的性質和酶的結構決定了固定化酶保持高催化活性的性能。本論文選擇利用納米TiO2和海藻酸鈉兩者優(yōu)良性質的結合，形成以吸附和包埋法相結合的固定化酶載體，同時利用Eudragit L-100的pH敏感

2、性，形成可逆固定化酶載體，在此基礎上選擇木瓜蛋白酶為模型蛋白對上述兩種載體的固定化條件進行探討和分析；進一步對固定化粗酶中含有的三種酶的活性條件進行了分析，并利用其催化甘油生產(chǎn)1，3-丙二醇。具體主要有以下幾個方面的研究：
　　1，對可逆固定化木瓜蛋白酶條件的探討：1)確定固定化載體Eudragit L-100最佳濃度為20g/L，而最佳時間為10min，重復使用5次后，其吸附率仍然可以達到94.6％；2)然后對固定化木瓜蛋白酶活

3、性最適合pH為9，溫度為45℃，重復使用5次后，酶活性仍然可以達到83%，同時對固定化酶進行了紅外分析，得出Eudragit L-100很好的負載了木瓜蛋白酶。
　　2，對吸附-包埋固定化木瓜蛋白酶條件的探討：1)得出TiO2的吸附作用對固定化木瓜蛋白酶起到了非常重要的作用，使其吸附率達到了85.6%，同時二氧化鈦性質的影響也很重要，粒徑越小、比表面積越大，其吸附率越大，同時穩(wěn)定性也最好。由此得出二氧化鈦用于吸附-包埋固定化木瓜蛋

4、白酶的較適合粒徑為10nm、比表面積為280m2/g：2)對于海藻酸鈉的探討中得出最佳的質量分數(shù)為3%，而氯化鈣的最佳濃度為1mol/L，并得出最佳固定化時間為25min。并對吸附-包埋固定化酶進行了SEM、EDS和紅外分析，以分析出TiO2和吸附-包埋固定化木瓜蛋白酶的物理化學性質，結構和表面性質。
　　3，對吸附-包埋法和可逆發(fā)固定的粗酶進行了分析：分析了兩種載體固定的粗酶中含有的三種重要酶：GDH、PDOR和GDHt，在不同