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1、作為全世界多數(shù)國家的重要糧食作物,小麥在全球多數(shù)地方育植。近年來,由于世界的不斷發(fā)展和人口的激增,小麥的需求量也越來越大。然而,由于長期以來惡劣氣候條件以及多種蟲害病害等因素的影響,小麥的產(chǎn)量和品質(zhì)都明顯下降,蚜蟲取食危害就首當(dāng)其沖,蚜蟲不僅通過口針吸取小麥汁液獲得營養(yǎng),而且能夠產(chǎn)生蜜露,影響小麥光合作用的同時(shí)也為多種病原菌的滋生創(chuàng)造條件,對(duì)小麥的實(shí)際生產(chǎn)造成損失。
MYB轉(zhuǎn)錄家族在植物新陳代謝和防衛(wèi)反應(yīng)中具有重要意義。當(dāng)植物
2、受到外界生物脅迫及非生物脅迫時(shí),MYB轉(zhuǎn)錄因子能夠參與到不同的調(diào)控進(jìn)程,達(dá)到防御外界脅迫的作用。在模式植物擬南芥中,關(guān)于MYB轉(zhuǎn)錄家族的研究很多,但是目前關(guān)于MYB轉(zhuǎn)錄家族如何參與調(diào)控植物防衛(wèi)反應(yīng)的研究還不是很深入,對(duì)小麥來說更是如此。
本研究根據(jù)實(shí)驗(yàn)室從小麥的73個(gè)已知序列全長的TaMYB基因中篩選出TaMYB19,TaMYB29及TaMYB44三個(gè)基因,當(dāng)小麥被蚜蟲取食侵害時(shí),這三個(gè)基因表達(dá)水平顯著增強(qiáng)。通過VIGS技術(shù)小
3、麥中對(duì)三個(gè)基因分別進(jìn)行沉默,獲得了沉默小麥植株后,對(duì)小麥抗蚜性以及乙烯信號(hào)通路參與的調(diào)控進(jìn)行研究。
1.三種TaMYB基因參與調(diào)控小麥對(duì)麥長管蚜的韌皮部防衛(wèi)反應(yīng)
本實(shí)驗(yàn)中,根據(jù)前人從73個(gè)已知序列全長的TaMYB基因中篩選出三個(gè)推測(cè)參與抗蚜的基因TaMYB19,TaMYB29及TaMYB44,利用BSMV-VIGS技術(shù),在小麥中分別沉默了這三個(gè)基因,對(duì)沉默植株中小麥的韌皮部防衛(wèi)反應(yīng)進(jìn)行研究。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),在三種沉默植
4、株中蚜蟲的取食偏好和繁殖率均有所提高,EPG波形圖分析顯示,沉默植株中蚜蟲在韌皮部的取食時(shí)間和取食次數(shù)增加,在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)沉默植株的葉片胼胝質(zhì)沉積率比對(duì)照少很多,減少了蚜蟲取食危害小麥的阻礙。同時(shí),檢測(cè)了韌皮部防衛(wèi)相關(guān)的編碼韌皮部凝集素蛋白的基因PP2-A以及編碼葡聚糖合酶的基因GSL2,GSL10,GSL12表達(dá)水平,檢測(cè)結(jié)果表明,在沉默植株中PP2-A以及GSL2,GSL10,GSL12的表達(dá)顯著降低,說明TaMYB19,TaM
5、YB29及TaMYB44參與了小麥的抗蚜調(diào)控。
2.乙烯信號(hào)通路在MYB調(diào)控抗蚜機(jī)制中的作用
乙烯是植物體內(nèi)一種參與到多種生長發(fā)育和新陳代謝的內(nèi)源性激素,乙烯介導(dǎo)的信號(hào)通路對(duì)于調(diào)控植物抗蟲性有重要作用。在模式植物擬南芥中,乙烯信號(hào)通路能夠與AtMYB44互作共同參與調(diào)控韌皮部防衛(wèi)反應(yīng),而且,在小麥中的研究發(fā)現(xiàn),乙烯信號(hào)通路在調(diào)控小麥對(duì)麥長管蚜的抗性調(diào)控中具有重要意義。
本實(shí)驗(yàn)中,在分別沉默TaMYB19,T
6、aMYB29及TaMYB44的小麥植株上使用乙烯抑制劑后,MYB基因的表達(dá)水平都受到不同程度的抑制,表明乙烯信號(hào)通路可能位于MYB調(diào)控的上游,并且能夠影響MYB基因的表達(dá)。同時(shí)發(fā)現(xiàn),在使用乙烯抑制劑處理的沉默小麥中EIN2基因的表達(dá)水平也受到影響,韌皮部防衛(wèi)相關(guān)的基因PP2-A以及GSL2,GSL10,GSL12的表達(dá)明顯降低,進(jìn)一步說明TaMYB19,TaMYB29及TaMYB44通過與乙烯信號(hào)通路互作,共同調(diào)控小麥的韌皮部防衛(wèi)反應(yīng),
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