表達Hpal10-42的轉基因小麥對蚜蟲的抗性和參與作用的MYB基因篩選.pdf

1、革蘭氏陰性植物病原細菌分泌的harpin蛋白能夠激活植物防衛(wèi)反應信號通路，誘導植物產生抗病、抗蟲等效應，還能夠促進植物生長。本文選用harpin蛋白的功能片段Hpal，研究其誘導小麥的抗蚜性。轉錄因子在植物的生長發(fā)育和應答各種生物、非生物脅迫的過程中起重要作用。本文篩選了介導轉基因小麥抗麥長管蚜作用的轉錄因子。并建立了基因沉默體系，為進一步研究轉錄因子的功能奠定了基礎。
　　1.轉基因小麥表達Hpal10-42抑制蚜蟲危害

2、　　Hpal是水稻白葉枯病菌產生的一種harpin蛋白，有促進植物生長、誘導植物抗病、抗蟲等多種有益效應，Hpal序列中的第10-42氨基酸殘基(Hpal10-42)在這些效應上的活性比Hpal全長高1.3-7.5倍。本研究發(fā)現(xiàn)，Hpal10-42的編碼序列轉入小麥基因組以后，可以誘導小麥對麥蚜優(yōu)勢種群即麥長管蚜的抗性。Hpal10-42誘導的抗性表現(xiàn)為，有效地抑制了蚜蟲在植株上初始定殖階段的習性，并且抑制了蚜蟲在轉基因植株上的繁殖，若

3、蚜生長和齡期發(fā)育。這些抗性的獲得與防衛(wèi)反應調節(jié)基因(EIN2、PP2-A和GSL10)的表達增強并且誘導防衛(wèi)反應基因(Hel、PDF1.2、PR-1b和PR-2b)的表達有關。因此，在轉基因植株上，蚜蟲的危害力降低了。Hpal10-42誘導的抗性水平在抑制蚜蟲侵襲方面與通過殺蟲劑的化學防治效果相當。結果表明，Hpal10-42的防衛(wèi)反應功能可望通過轉基因手段用于作物抗蟲育種，在農作物育種的應用上有很大潛力。
　　2.參與轉基因小麥

4、抗蚜作用的MYB基因篩選
　　轉錄因子應答細胞內外信號，調節(jié)基因表達水平或控制基因的時空表達特異性。植物有7個主要的轉錄因子家族，其中MYB家族成員最多，在植物生長發(fā)育和防衛(wèi)反應過程中起到重要作用。本研究主要目的是篩選參與轉基因小麥與蚜蟲互作的MYB基因，為了進一步驗證其功能，構建了大麥條斑花葉病毒(BSMV)誘導的基因沉默體系。我們對小麥中的60個MYB轉錄因子在抗蚜防衛(wèi)反應中是否起作用進行了篩選。與Y16野生型相比，在Y16∶