轉(zhuǎn)基因水稻Bt殺蟲(chóng)蛋白的表達(dá)及對(duì)二化螟的抗性.pdf

1、采用室內(nèi)離體葉片測(cè)定法和活體成株生物測(cè)定法、酶聯(lián)免疫檢測(cè)(ELISA)、電鏡觀察組織病理變化等技術(shù)方法，初步研究了轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因水稻對(duì)二化螟的抗蟲(chóng)作用?！　≡趯?shí)驗(yàn)室內(nèi)采用荸薺和茭白等半人工飼料替代水稻苗成功飼養(yǎng)二化螟種群，為課題研究提供了蟲(chóng)源保障。　　采用ELISA方法，對(duì)MSA和MSB品種(均為轉(zhuǎn)Cry1Ac/CpTI雙價(jià)抗蟲(chóng)水稻(Oryzasativa)純合株系)的稻中Bt蛋白含量進(jìn)行檢測(cè)。Cry1Ac殺蟲(chóng)蛋白基因在轉(zhuǎn)Cry1Ac/

2、CpTI雙價(jià)抗蟲(chóng)水稻(Oryzasativa)各部位中均得到了表達(dá)。不同水稻生育期及不同部位Cry1Ac殺蟲(chóng)蛋白的表達(dá)量均有所不同。總的趨勢(shì)是生育前期的表達(dá)量較生育后期高。在時(shí)間上，主莖葉片中的殺蟲(chóng)蛋白在拔節(jié)期最高，孕穗期開(kāi)始下降，在揚(yáng)花期和和灌漿期達(dá)到最低，到成熟期略有回升；主莖中的殺蟲(chóng)蛋白在苗期、拔節(jié)和揚(yáng)花期較高，種子中含量很低。采用離體葉片測(cè)定法對(duì)二化螟幼蟲(chóng)進(jìn)行生物學(xué)測(cè)定?！　〔捎秒x體葉片測(cè)定法比較了三種轉(zhuǎn)不同抗蟲(chóng)基因水稻對(duì)二化

3、螟的抗蟲(chóng)效果差異。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因水稻品種MSB(Cry1Ac/CpTI雙價(jià)基因)C對(duì)二化螟的毒殺效果明顯高于其它轉(zhuǎn)基因水稻品種。二化螟在取食后第4天，取食MSB各個(gè)時(shí)期的主莖頂葉的幼蟲(chóng)死亡率在苗期、分蘗期、拔節(jié)期均達(dá)到了100％，取食81AS1(轉(zhuǎn)CpTI基因)86AS2(轉(zhuǎn)CpTI基因)86AB(轉(zhuǎn)cry1Ac基因)、86AB2(轉(zhuǎn)cry1Ac基因)各個(gè)時(shí)期的主莖頂葉的幼蟲(chóng)死亡率大多數(shù)時(shí)期僅在30％左右，在81AS1、86AS2、8