交通相關(guān)細顆粒物對CEM-6T細胞凋亡的影響.pdf

1、第一部分交通相關(guān)細顆粒物對CEM-6T CEM-6T CEM-6T CEM-6T細胞凋亡的誘導(dǎo)作用
　　 目的:探討交通相關(guān)細顆粒物污染對CEM-6T細胞凋亡的誘導(dǎo)作用。
　　 方法:四甲基偶氮唑蘭(MTT）比色法測定交通相關(guān)細顆粒物對CEM-6T細胞增殖功能的影響；AO/EB 熒光探針觀察PM2.5作用下CEM-6T細胞形態(tài)學(xué)的改變；FITC-AnnexinV/PI 染色流式細胞儀測定交通相關(guān)細顆粒物染毒CEM-6T細

2、胞的早期凋亡和壞死；RT-PCR 測定CEM-6T細胞caspase-3的mRNA表達。
　　 結(jié)果:160(48h 除外)、320、800μg/mLPM2.5 染毒細胞24h和48h 可抑制細胞增殖功能，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）；AO/EB 染色法發(fā)現(xiàn)，被染成紅色的晚期凋亡和壞死細胞隨著染毒劑量增加逐漸增多；經(jīng)FITC-Annexin V/PI 染色流式細胞儀測定，320μg/mLPM2.5 染毒細胞24h

3、后，細胞早期凋亡比生理鹽水組升高，20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細胞48h，細胞早期凋亡比生理鹽水組升高，320μg/mL PM2.5 染毒細胞24h和48h，細胞壞死比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）；20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細胞24h和48h，細胞caspase-3 比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:

4、交通相關(guān)的細顆粒物對CEM-6T細胞增殖功能有抑制作用，可誘導(dǎo)CEM-6T細胞凋亡。
　　 第二部分交通相關(guān)細顆粒物誘導(dǎo)CEM-6T CEM-6T CEM-6T CEM-6T細胞凋亡機制的探討
　　 目的:探討交通相關(guān)細顆粒物誘導(dǎo)CEM-6T細胞凋亡機制。
　　 方法:線粒體途徑的測定，羅丹明123 法檢測交通相關(guān)細顆粒物染毒CEM-6T細胞線粒體膜電位的改變用，Western Blot測定交通相關(guān)細顆粒物染毒C

5、EM-6T細胞Caspase-9、Cyt-c蛋白表達；死亡受體途徑的測定，Western Blot測定交通相關(guān)PM2.5 染毒CEM-6T細胞Fas-L、Caspase-8、TNF-α蛋白表達。
　　 結(jié)果:160、320μg/mLPM2.5 染毒細胞24h與80、160、320μg/mLPM2.5 染毒48h細胞線粒體膜電位均低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）；20(48h 除外)、80、320μg/mL PM2.5

6、染毒細胞24h和48h，Cyt-c/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細胞24h和48h，細胞Caspase-9/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL (48h 除外)、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細胞24h和48h，細胞Fas-L/β-actin灰度比值

7、比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒細胞24h和48h，細胞Caspase-8/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL (48h 除外)、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細胞24h和48h，細胞TNF-α/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:線