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文檔簡介
1、高純度蛋白質(zhì)在免疫診斷學(xué)、免疫療法和生物科學(xué)研究等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用,因而制備具有快速、高效蛋白質(zhì)吸附性能的材料已成為生物科技領(lǐng)域一個十分重要的研究課題。在蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)中,離子交換層析技術(shù)是最有效的分離手段之一,也是很重要的蛋白質(zhì)純化方法。采用這種方法分離純化蛋白質(zhì)具有很多優(yōu)點(diǎn),如分離效率高、操作簡單、適用范圍廣、有利于規(guī)?;a(chǎn)、蛋白質(zhì)不易失活等。
本文通過以聚乙烯醇(Poly(vinyl alcohol), PVA)
2、和順丁烯二酸酐(Maleic anhydride, MAH)為原料,將靜電紡絲技術(shù)和原位接枝聚合相結(jié)合的方法制備了具有良好蛋白質(zhì)吸附性能的超細(xì)纖維膜。靜電紡絲技術(shù)可以制備出具有超細(xì)纖維尺度和較大比表面積的高分子聚合物纖維膜,通過調(diào)控紡絲工藝參數(shù)可以很好地控制纖維膜的孔結(jié)構(gòu),為蛋白吸附提供了良好的前提;原位接枝聚合技術(shù)通過對PVA高分子聚合物表面進(jìn)行改性處理,拓寬了超細(xì)纖維膜的應(yīng)用領(lǐng)域。
通過本課題的研究,我們成功制備了具有較大
3、比表面積、較高孔隙率、三維曲孔連通結(jié)構(gòu)和良好機(jī)械性能的PVA/MAH超細(xì)纖維膜,同時(shí)其表面具有豐富的羧酸基團(tuán),因而可實(shí)現(xiàn)對帶正電蛋白質(zhì)的特異性吸附。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)探究發(fā)現(xiàn),MAH的含量是影響合成PVA/MAH超細(xì)纖維膜吸附性能的關(guān)鍵性因素,通過對不同MAH含量的PVA/MAH超細(xì)纖維膜進(jìn)行吸附性能測試,結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)MAH與PVA的摩爾比為30%,吸附性能達(dá)到最佳,對溶菌酶的最大吸附量達(dá)到177mg/g;而通過探究吸附時(shí)間對吸附性能的影響,發(fā)現(xiàn)其
4、吸附平衡時(shí)間僅為4小時(shí);對PVA/MAH超細(xì)纖維膜進(jìn)行10次循環(huán)吸附性能測試,結(jié)果表明其重復(fù)使用性能良好。此外,僅在重力產(chǎn)生的相對較小壓降(750Pa)下, PVA/MAH超細(xì)纖維膜對溶菌酶的飽和動態(tài)吸附量可達(dá)159mg/g;通過對溶菌酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白、卵清蛋白和胃蛋白酶的混合蛋白溶液進(jìn)行吸附實(shí)驗(yàn),并結(jié)合十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分析,驗(yàn)證了PVA/MAH超細(xì)纖維膜在捕獲蛋白的過程中具有選擇性。
本
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