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1、青霉素?;甘且环N重要的工業(yè)用酶,能夠催化青霉素G生成6-氨基青霉烷酸(制備半合成青霉素的重要中間體)。青霉素酰化酶催化青霉素G水解選擇性高、專一性強、反應(yīng)條件溫和、能耗低。盡管青霉素?;赣兄T多優(yōu)良的性質(zhì),但其回收困難、穩(wěn)定性差制約了其應(yīng)用。將酶固定于載體上能很好地解決這個問題。大孔材料孔道寬闊,傳質(zhì)阻力小,具有良好的通透性,在固定化酶領(lǐng)域很有研究價值。本實驗以大孔材料為載體,采用共價法固定化青霉素?;?。
本文將青霉素?;?/p>
2、酶固定于大孔材料中,并對固定化酶的催化性能進(jìn)行了研究。主要研究內(nèi)容總結(jié)如下:
?。?)利用高內(nèi)相比乳液模板法制備層級大孔介孔氧化硅整體柱。利用后嫁接法將氨基和環(huán)氧基修飾到整體柱上,之后利用共價鍵將酶分子固定于大孔材料中。研究了固定化酶的催化性能及穩(wěn)定性。相比于游離酶,固定化酶適宜的pH和溫度的范圍更寬,穩(wěn)定性更好。
(2)受生物粘合現(xiàn)象的啟發(fā),利用去甲腎上腺素在堿性條件下能夠聚合形成去甲腎上腺素層薄膜的性質(zhì)對材料進(jìn)行修
3、飾。該層薄膜對蛋白質(zhì)分子上的氨基、巰基有較高的反應(yīng)活性,能夠通過共價鍵將酶分子固定于載體表面。利用去甲腎上腺素的這種性質(zhì)首次對三維有序大孔二氧化硅進(jìn)行修飾,并固定化青霉素?;?。對固定化過程進(jìn)行了優(yōu)化,考察了固定化酶的穩(wěn)定性。為了進(jìn)一步驗證該固定化酶在工業(yè)應(yīng)用的可能性,將制備的固定化酶應(yīng)用于填充床中用于水解青霉素G,考察固定化酶在連續(xù)催化過程中的催化性能。實驗發(fā)現(xiàn)固定化酶在連續(xù)水解青霉素G鉀鹽15天之后仍具有較高活性,這無疑為固定化酶在
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