5-氨基間苯二甲酸敏化LaF3-Tb發(fā)光納米粒子的合成及細(xì)胞成像研究.pdf

1、生物標(biāo)記技術(shù)是生物學(xué)中最重要的技術(shù)之一，其發(fā)展方向是增強(qiáng)標(biāo)記物生物兼容性、提高痕量檢測水平以及進(jìn)行活體/活細(xì)胞的標(biāo)記成像。稀土發(fā)光納米材料因其優(yōu)異且獨(dú)特的光學(xué)和化學(xué)性能，在生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用受到越來越多的關(guān)注。然而，在目前有關(guān)稀土下轉(zhuǎn)換納米材料的研究中，合成材料的最大激發(fā)波長大多位于遠(yuǎn)紫外光區(qū)(小于300 nm)，由于遠(yuǎn)紫外光對生物組織和細(xì)胞有一定的殺傷作用，這極大的限制了稀土下轉(zhuǎn)換納米材料在生物標(biāo)記和成像領(lǐng)域的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)嘗試合成一種

2、新型的最大激發(fā)波長位于近紫外區(qū)，發(fā)光強(qiáng)度大且生物相容性好的稀土下轉(zhuǎn)換納米粒子。
　　以檸檬酸鈉為修飾劑，以5-氨基間苯二甲酸(APA)為敏化劑，水熱法一步合成了APA敏化LaF3∶Tb(APA-LaF3∶Tb)納米粒子。以粒子的發(fā)光強(qiáng)度和水溶性為考察指標(biāo)，對合成條件進(jìn)行了優(yōu)化，最佳條件為:反應(yīng)體系的pH值為8.0，反應(yīng)溫度為130℃，反應(yīng)時間為1.0 h，APA與鋱離子的摩爾比為5∶1，檸檬酸鈉與稀土離子的摩爾比為0.6∶1，氟化

3、銨與稀土離子的摩爾比為3∶1。合成粒子的最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為348 nm和544 nm，發(fā)光壽命為2.55 ms，水溶性良好。
　　采用X射線衍射、透射電鏡、紅外光譜等手段對APA-LaF3∶Tb納米粒子進(jìn)行了表征，結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)合成了六方晶系的APA-LaF3∶Tb晶體，形貌為類球形和棒狀，類球形粒徑約為10nm，棒狀約為20×5nm。通過測定合成粒子的發(fā)光壽命，表明APA在粒子表面的包覆。和LaF3∶Tb粒子相比，APA-

4、LaF3∶Tb粒子的激發(fā)波長紅移109 nm，發(fā)光強(qiáng)度增大25倍。
　　在合成的基礎(chǔ)上，對APA-LaF3∶Tb粒子進(jìn)行了氨基化修飾，并采用紅外光譜、透射電鏡等手段對氨基化APA-LaF3∶Tb納米粒子進(jìn)行了表征，結(jié)果表明，在APA-LaF3∶Tb納米粒子表面成功地修飾了氨基，修飾后粒子的粒徑約30nm。
　　將氨基化APA-LaF3∶Tb納米顆粒與兔抗人CEA8抗體偶聯(lián)，基于HeLa細(xì)胞表面的CEA抗原與兔抗人CEA8抗體