產油微藻生長調控及其促進劑對長鏈脂肪酸生物合成的影響.pdf

1、生物柴油是一種可替代普通柴油的清潔的可持續(xù)能源，其主要成分是一些以生物體油脂為原料，通過分解、酯化而得到的長鏈脂肪酸甲酯。近年來，隨著石油價格的不斷攀升以及各種環(huán)境問題的凸顯，生物柴油迎來了新一輪的發(fā)展機遇。目前，生物柴油生產應用的最大瓶頸問題是原材料，其價格占到生物柴油成本的70％以上。因此，尋找合適的廉價原材料，從而降低生物柴油的生產成本，對生物柴油的大規(guī)模應用至關重要。
　　 微藻是一種具有較強光合能力的自養(yǎng)微生物。自然界

2、中一些微藻的油脂含量非常豐富，能夠達到其干重的20％以上，且油脂成分與生物柴油相似，可以作為生物柴油生產的原材料。利用微藻生產生物柴油具有周期短、不與農作物爭耕地、不受氣候條件限制等諸多優(yōu)勢，因而成為近年來的研究熱點。但是利用微藻生產生物柴油過程中尚有許多科學問題需待解決，如富油藻種的篩選及高效培養(yǎng)、脂質的高效提取以及脂質的轉酯化等。
　　 鑒于此，本研究以能源微藻柵藻Scenedesmus sp.和小球藻FACHB-40為研究

3、對象，綜合運用核素示蹤技術、現代儀器分析技術和生物技術等，系統(tǒng)研究了該藻生長調控及其促進劑對長鏈脂肪酸生物合成的影響。主要結果如下:
　　 (1)培養(yǎng)條件對柵藻生長及脂質積累的影響
　　 本試驗研究了培養(yǎng)時間、不同pH以及不同濃度M試劑對藻體的生長以及藻體內長鏈脂質含量的影響。研究結果表明該藻適于在堿性環(huán)境(pH8-10)中生長。進一步試驗表明，當BG11培養(yǎng)基外源添加M試劑能有效促進柵藻的快速生長和藻體內脂質的積累。<

4、br>　　 (2)柵藻脂肪酸提取方法改進
　　 本實驗探索了30種不同的脂肪酸提取方法。通過GC分析不同提取方法獲得的長鏈脂肪酸甲酯含量，發(fā)現藻體經過真空冷凍干燥后，用二氯甲烷/甲醇(V∶V，2∶1)振蕩提取能獲得最佳的脂肪酸酯提取效率，且較之其他提取方法，該法能夠提取出更多的烯酸酯。
　　 (3)外源添加乙醇對其脂肪酸組成的影響
　　 GC-MS分析證實，與對照（普通BG11培養(yǎng)基培養(yǎng)）相比，柵藻經改良培養(yǎng)基

5、（外源添加乙醇，濃度為2.4‰）培養(yǎng)20 d后，脂肪酸種類和含量均出現明顯變化，表明外源添加乙醇對柵藻脂肪酸的組成有顯著影響。乙醇處理后，硬脂酸含量顯著下降（僅為原來的47.7％），而其他脂肪酸含量增加。
　　 (4)乙醇在柵藻藻體內轉化規(guī)律
　　 本試驗以14C標記乙醇為示蹤劑，利用高效液相色譜、氣相色譜-質譜聯(lián)用儀以及液體閃爍測量儀等儀器，研究了放射性乙醇在目標長鏈脂肪酸甲酯中的分布規(guī)律。通過追蹤放射性乙醇轉化產物，