新型高效的DNA生物傳感器的制備與應用研究.pdf

1、華東師范大學碩士學位論文新型高效的DNA生物傳感器的制備與應用研究姓名：趙潔申請學位級別：碩士專業(yè)：分析化學指導教師：方禹之何品剛20050501摘要第一章：緒論首先系統(tǒng)介紹了DNA序列測定的研究進展。介紹了DNA生物傳感器的原理(包括DNA生物傳感器的分予以別原理及DNA在固體基質(zhì)表面的固定化)和分類，并總結(jié)了DNA生物傳感器的特點和發(fā)展新動向。接著介紹了磁性納米顆粒及其在基因分離檢測中的應用，和熒光探針及應用。最后闡述了本論文的目的

2、和意義。第二章柔紅霉素識別基于磁性納米顆粒的DNA電化學生物傳感器的研究本文將納米技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)與電化學分析技術(shù)相結(jié)合，研制了具有高靈敏度和高選擇性的基于磁’陛納米顆粒的電化學I)NA生物傳感器。用人工合成的5’端氨基修飾的寡聚核苷酸片段與磁性納米顆粒連接，即制備成DNA探針。探針上的寡聚核昔酸片段與不同序列的寡聚核苷酸片段雜交后，用聚吡咯摻雜碳納米管修飾電極(MWNTCOOT／ppyCME)對嵌入式雜交指示劑柔紅霉素進行電化學

3、檢測通過雜交前后電化學信號的變化可實現(xiàn)對靶寡聚核苷酸序列的檢測。以上所述的DNA探針，與非互補序列的寡聚核苷酸片段雜交后，柔紅霉素的信號幾乎與空白探針的柔紅霉素信號一致，而一個堿基錯配，兩個堿基錯配，三個堿基錯配的靶序列與完全互補的靶序列所得的信號可明顯地區(qū)分丌。說明此種方法可實現(xiàn)DNA片段中突變點的檢測。實驗所得線性方程為ip(pA)=o8255—00847cDNAxl0B，線性范圍為69x10。14～86xlff|3mol／L，相關(guān)

4、系數(shù)為09974，最低檢出限為2310Ⅲmol／L。第三章亞甲基藍識別基于磁性高分子微球的DNA電化學生物傳感器的研究磁性高分子微球是一種具有親和性的固相載體，其粒徑小，具有超順磁性，表面積大。本文利用Fe2、Fe3在NH40H溶液l扣共沉淀法制備納米磁性粒子，并采用分散聚合法，制成表面含豐富的活性基團COOH的磁性高分子微球在偶聯(lián)活化劑EDAC作用下，51端修飾胺基的寡聚核苷酸片段共價固定到的磁性高分子微球上，即制備成DNA探針。探針