電化學(xué)DNA生物傳感器的制備.pdf

1、本文利用自組裝膜法，將人工合成的鼠疫單鏈DNA作為檢測(cè)目標(biāo)，將與其互補(bǔ)的單鏈DNA片段固定在金電極表面，制成分子探針，結(jié)合電化學(xué)活性物質(zhì)醛基二茂鐵構(gòu)成夾心面包式DNA電化學(xué)傳感器。在探針合成過(guò)程中，探討了自組裝膜的成膜條件，以及DNA固定和雜交機(jī)理，并考察了探針的電子傳遞性。利用合成的探針對(duì)溶液中互補(bǔ)DNA進(jìn)行定性和定量分析。在對(duì)標(biāo)準(zhǔn)互補(bǔ)液的雜交檢測(cè)過(guò)程中，探討了雜交時(shí)間、雜交溫度、信號(hào)DNA的合成條件等對(duì)DNA電化學(xué)傳感器的影響。利用

2、DNA電化學(xué)生物傳感器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)DNA樣品，測(cè)定傳感器的檢測(cè)范圍、雜交特異性和壽命等基本性能。 本課題所研制的以亞甲基蘭(MB)為電化學(xué)活性指示劑的嵌入式DNA生物傳感器。其中寡聚DNA探針通過(guò)-SH與Au的反應(yīng)而連到金電極表面，用線性掃描伏安法檢測(cè)電極表面DNA是否組裝完成。用與探針DNA完全互補(bǔ)的ssDNA溶液與探針進(jìn)行雜交反應(yīng)。雜交后可看到MB的峰電流減小，當(dāng)目標(biāo)DNA的濃度在5.0×10-10到1.8×10-9mol/L時(shí)

3、，MB的峰電流與目標(biāo)DNA濃度呈線性關(guān)系。檢出限是5.0×10-10mol/L。 納米金自組裝于金電極表面可以增強(qiáng)DNA在電極表面的固著量。用恒電位吸附的方式將探針DNA修飾到金電極上，并通過(guò)Co(phen)32+表征修飾電極的電化學(xué)性能。比較了在納米金修飾金電極上吸附的DNA電信號(hào)與在棵金電極上吸附DNA的電信號(hào)，前者有明顯的增大，并考察了DNA修飾金電極的穩(wěn)定性。探討了ssDNA與dsDNA的吸附特性，同時(shí)，比較了DNA在不