基于固體電極修飾的DNA電化學(xué)生物傳感器研究.pdf

1、本論文分三部分，第一部分合成了一種電活性配合物，并且用此配合物作為指示劑發(fā)展了一種新型的電化學(xué)DNA傳感器；第二部分和第三部分發(fā)展了兩種無指示劑的DNA傳感器。 1、合成了硝酸二水·雙N-(2-吡啶甲基)苯甲酰胺合鎘(Ⅱ)(簡稱為[CdL2]2+)配合物，通過X-單晶衍射法表征了配合物的結(jié)構(gòu)，用電化學(xué)和熒光的方法研究了此配合物與dsDNA的相互作用機理。結(jié)果表明[CdL2]2+在玻碳電極上有很好的電化學(xué)活性并且與dsDNA發(fā)生了

2、嵌插結(jié)合作用。在0.2molL-1NaAc-HAc(pH7.02)介質(zhì)中，[CdL2]2+與dsDNA形成的復(fù)合物的結(jié)合比為2:1，結(jié)合常數(shù)為25.56L1/2mol-1/2。以[CdL2]2+為指示劑制備了一種檢測乙肝病毒(HBV)的新型的電化學(xué)傳感器。將21個堿基序列的HBV單鏈寡核苷酸(HBV-ssDNA)通過共價鍵合作用固定到玻碳電極上，與其互補序列單鏈DNA進(jìn)行雜交，雜交信號通過微分脈沖的方法(DPV)進(jìn)行表征。此DNA傳感器

3、對目標(biāo)HBV-ssDNA的檢測范圍為1.01×10-8～1.62×10-6mol·L-1，相關(guān)系數(shù)為0.9962，檢測限為7.19×10-9mol·L-1(3σ，n=11)。 2、制備了一種新型的用2-巰基苯并噻唑(MBT)自組裝金電極檢測目標(biāo)ssDNA的電化學(xué)生物傳感器。因為MBT可以嵌插入dsDNA的雙螺旋之中，所以可以用Au-MBT選擇性的區(qū)分ssDNA和dsDNA，通過掃描電鏡和循環(huán)伏安的方法預(yù)先表征了Au-MBT的組裝

4、情況。在過量的探針ssDNA和適量的目標(biāo)ssDNA的雜交溶液中，以組裝電極為工作電極通過DPV表征了DNA的雜交情況。發(fā)現(xiàn)目標(biāo)ssDNA的濃度與還原峰電流有一定的線性關(guān)系。此傳感器對目標(biāo)ssDNA的檢測范圍.為1.59×10-8～2.4×10-6mol·L-1，檢測限為2.38×10-9mol·L-1(3σ，n=11)。Au-MBT電極具有良好的重現(xiàn)性和再生性，在10次檢測/再生的循環(huán)過程中，峰電流信號沒有明顯的變化。此種傳感器制備方便

5、，價格低廉，在連續(xù)和定量檢測實際的生物樣品中目標(biāo)ssDNA方面具有很大的發(fā)展?jié)摿Α?3、制備了一種用2-巰基苯并咪唑(MBI)自組裝金電極檢測目標(biāo)ssDNA的電化學(xué)生物傳感器。與第二部分不同的是，利用Au-MBI檢測時，首先用固定了探針ssDNA的玻碳電極將目標(biāo)ssDNA從樣品中分離出來，然后將目標(biāo)ssDNA轉(zhuǎn)移到新的溶液中再用組裝電極檢測雜交情況，此傳感器對目標(biāo)ssDNA的檢測范圍為1.32×10-8～1.59×10-6mol