探索DDAVP聯合IL-4對巨噬細胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表達影響.pdf

1、目的：探索DDAVP聯合IL-4對RAW264.7細胞系（小鼠單核巨噬瘤細胞）LPCATmRNA和PAF-AH mRNA的表達影響。
　　方法：本實驗共分為四組，即RAW264.7細胞系接受4種不同的培養(yǎng)方法，共培養(yǎng)12.5小時，然后提取細胞總mRNA。IL-4+DDAVP組：先用含IL-4（10 ng/ml）的高糖 DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng) RAW264.7細胞12小時，然后用含 DDAVP（100ng/ml）的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)

2、30min，提取細胞總mRNA。DDAVP組：先用高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細胞12小時，然后用含DDAVP（100ng/ml）的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)30min，提取細胞總mRNA。IL-4組：先用含有IL-4（10 ng/ml）的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細胞12.5小時后，然后提取細胞總mRNA?？瞻讓φ战M：先用高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細胞12.5小時后，提取細胞總mRNA。將各組mRNA逆轉

3、錄成cDNA，應用實時熒光定量PCR檢測細胞LPCAT mRNA和PAF-AH mRNA的表達水平。表達水平=（Etarget）CTcontrol-CTsample）/（Eref）CTcontrol-CTsample），CTcontrol為actin的擴增循環(huán)數， CTsample所測產物 PAF-AH、LPCAT mRNA的擴增循環(huán)數， Eref為 actin mRNA的擴增效率，Etarget為所測產物PAF-AH、LPCAT mR

4、NA的擴增效率。應用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，計算每組6個樣本的?±s，進行方差分析，兩組間比較采用LSD t檢驗以及Dunnett T3 t檢驗，P＜0.05。
　　結果：四個實驗組RAW264.7細胞LPCAT mRNA表達水平分別為：IL-4+DDAVP組為1.23±0.41，DDAVP組為0.77±0.35，IL-4組為0.95±0.42，空白對照組為0.70±0.23，方差分析結果為，F=2.58，方差齊，LPC