桑樹葉色突變體色素變化及其分子機(jī)理的研究.pdf

1、葉色突變體是研究光合系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能及其調(diào)控機(jī)制的理想材料,在培育新品種方面也有很高的應(yīng)用價(jià)值,桑樹葉色突變體是稀有的種質(zhì)資源,研究其生理生化特性及突變機(jī)理具有重大意義.該研究首先利用無性繁殖技術(shù)探討了桑樹白化葉色突變體(Cty-Wm)和黃化葉色突變體(Cty-Ym)的遺傳特性,結(jié)果表明兩者均為穩(wěn)定遺傳變異,其中白化突變體由于自身不能進(jìn)行光合作用而無法存活,屬于致死突變.為確定桑樹黃化突變體的突變類型,測定了不同時(shí)期突變體的色素含量,結(jié)果

2、表明黃化突變體的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量僅為對照桑的25﹪、18﹪和43﹪,而晚秋時(shí)葉綠素含量明顯增加,類胡蘿卜素含量則幾乎沒有變化,說明黃化突變體Cty-Ym屬于缺總Ch1型,葉色黃化與葉綠素含量減少有關(guān).在離體培養(yǎng)條件下,探討了桑樹黃化突變體的生物學(xué)特性,發(fā)現(xiàn)在不同溫度及光照條件下均表現(xiàn)黃化特征,證明該突變體葉色黃化與否與溫度變化無關(guān),不屬于溫敏型或光敏型葉色突變體,但突變體的黃化程度受溫度影響而有一定的變化.為探討突變體

3、變異的分子機(jī)理,采用三種方法提取突變體和對照桑葉片的基因組DNA,結(jié)果表明2×CTAB提取法效果較好.在建立穩(wěn)定的RAPD技術(shù)體系的基礎(chǔ)上,采用10個(gè)引物對突變體和對照桑葉片DNA進(jìn)行RAPD分析,有5個(gè)引物擴(kuò)增出豐富的條帶,其中用引物B107進(jìn)行RAPD擴(kuò)增反應(yīng),在突變體和對照桑之間得到了不同的結(jié)果.采用IEF/SDS-PAGE雙向電泳技術(shù)分離了突變體和對照桑葉片蛋白質(zhì),應(yīng)用PDQuest軟件分析結(jié)果,發(fā)現(xiàn)184個(gè)蛋白位點(diǎn)中有36處差