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1、惡臭假單胞菌KT2442一直被認(rèn)為是生產(chǎn)含C6~C14單體中長(zhǎng)鏈聚羥基脂肪酸酯(PHA)共聚物的一類細(xì)菌。本課題通過(guò)分子生物學(xué)手段,從惡臭假單胞菌KT2442基因組里敲除編碼3-羥基脂酰-ACP:CoA酰基轉(zhuǎn)移酶(3-hydroxyacyl-ACP:CoA transacylase)的phaG和幾個(gè)β-氧化途徑相關(guān)酶基因,如fadB、fadA、fadB2x和fadAx,從而構(gòu)建出的突變菌P. Putida KTHH03。KTHH03可以
2、生產(chǎn)出中長(zhǎng)鏈PHA均聚物,包括聚3-羥基己酸酯(poly-3-hydroxyhexanoate)(PHHx),聚3-羥基庚酸酯(poly-3-hydroxyheptanoate)(PHHp)和接近均聚物的聚3-羥基辛酸酯poly(3-hydroxyoctanoate-co-2mol% 3-hydroxyhexanoate)(PHO*)。當(dāng)敲除它的PHA合酶基因(phaC1和phaC2)之后,帶有嗜水氣單胞菌4AK4(Aeromonas
3、hydrophila 4AK4)操縱子 phaPCJ的重組突變菌P. Putida KTHH08可以積累聚3 -羥基戊酸酯poly(3-hydroxyvalerate)(PHV);帶有羅氏真氧菌(Ralstonia eutropha)phaC基因的重組突變菌P. Putida KTHH06可以合成聚3-羥基丁酸酯(poly-3-hydroxybutyrate)(PHB),聚4-羥基丁酸酯poly-4-hydroxybutyrate)(P
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