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文檔簡(jiǎn)介
1、本實(shí)驗(yàn)研究的藍(lán)藻是從雨生紅球藻中分離出來(lái)的一株內(nèi)生藍(lán)藻。前期測(cè)序和電鏡圖表明此株藍(lán)藻是一個(gè)新種,在不同光照條件下的細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)差別很大,強(qiáng)光藻體有明顯葉綠體結(jié)構(gòu),所以本文對(duì)藍(lán)藻兩種光照下的光系統(tǒng)色素組成進(jìn)行了研究,通過(guò)測(cè)定其色素組成和含量從而為葉綠體起源提供依據(jù)。
本文主要研究結(jié)果如下:
葉綠素的分離純化實(shí)驗(yàn)表明:葉綠素提取時(shí),選取100%丙酮提取,效果最好,能最大限度地將葉綠素從藻體中提取出來(lái);選取紙層析方法分離葉
2、綠素,選取的展開(kāi)劑系統(tǒng)為:石油醚:丙酮7:3(體積比)。進(jìn)行的光譜學(xué)特征測(cè)定進(jìn)一步確定了強(qiáng)光下藻種葉綠素種類為:葉綠素a和葉綠素b,弱光下藻種葉綠素只有葉綠素a一種,并進(jìn)行了含量計(jì)算。
類胡蘿卜素的分離純化實(shí)驗(yàn)表明:類胡蘿卜素提取時(shí),選取100%丙酮提取,效果較好,萃取濃縮時(shí)較為容易將石油醚與丙酮分開(kāi);選取紙層析的方法分離類胡蘿卜素簡(jiǎn)便快捷,選取的展開(kāi)劑系統(tǒng)為,β-胡蘿卜素:石油醚:丙酮7:3,葉黃素的分離選取的展開(kāi)劑為:石油
3、醚:丙酮:異辛烷20:2:1;同時(shí)加入幾滴醋酸來(lái)調(diào)節(jié)溶劑的極性達(dá)到最好的分離效果。光譜學(xué)特征測(cè)定進(jìn)一步確定了類胡蘿卜素的種類和含量。強(qiáng)光下含有β-胡蘿卜素和葉黃素,弱光下只有β-胡蘿卜素。
藻藍(lán)蛋白分離純化實(shí)驗(yàn)表明:提取藻藍(lán)蛋白選取的最佳提取劑為0.75MPBS緩沖液,并且放冰箱過(guò)夜提取。純化藻藍(lán)蛋白的過(guò)程采用二次鹽析的方法,選取的硫酸銨濃度為:一次鹽析為25%,二次鹽析為55%,沉淀用0.01molPBS溶解效果最好。通過(guò)對(duì)
4、純化后藻藍(lán)蛋白的提取液的紫外吸收光譜和熒光發(fā)射光譜的測(cè)定,進(jìn)一步為藻藍(lán)蛋白的種類和類型含量計(jì)算提供了依據(jù),并得出結(jié)論:弱光下藻藍(lán)蛋白濃度較高,并且只含有C型藻藍(lán)蛋白一種,強(qiáng)光下藻種中未發(fā)現(xiàn)藻藍(lán)蛋白。
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)色素組成分析得出,弱光下光能傳遞機(jī)理為:光能-大部分葉綠素a、β-胡蘿卜素-葉綠素a。強(qiáng)光下光能傳遞機(jī)理為:光能-葉綠素b、類胡蘿卜素、大部分葉綠素a-葉綠素a。弱光藍(lán)藻色素組成為典型原核生物特征,而在光照強(qiáng)度變化后,
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