三種食用菌多糖提取分離及降血糖和抗氧化作用的研究.pdf

1、食用菌豐富的營養(yǎng)價值，較高的多糖等生物活性物質(zhì)含量決定了它具有多種保健作用，特別是抗氧化、降血糖作用。金頂側耳（Pleurotus citrinopileatus Sing）、姬菇(Pleurotus cornucopiae)和毛頭鬼傘(Coprinus comatus)都是近年來具有開發(fā)和推廣價值的珍稀優(yōu)質(zhì)食用菌，他們營養(yǎng)豐富，具有多種保健及藥用價值。
　　 本文對金頂側耳、姬菇和毛頭鬼傘子實體多糖采取熱水提取法得到粗多糖，粗

2、多糖經(jīng)脫蛋白、透析等步驟后得到精多糖。粗多糖得率在31～38％間，多糖含量在20～51％間；精多糖得率在15～19％間，多糖含量在48～75％間。金頂側耳、姬菇精多糖經(jīng)Sepharose4B 分離，分別得到一個大分子多糖組分Ⅰ（得率為2.49％和6.53％）和一個小分子多糖組分Ⅱ（得率為1.36％和2.85％），其中金頂側耳這兩個多糖組分有O2-的清除活性，兩種多糖組分Ⅰ的多糖含量為92％和93％，在波長260nm和280nm處無明顯的

3、吸收，表明兩種多糖不含核酸和蛋白質(zhì)；紅外光譜顯示它們具有多糖特征吸收峰，屬于α-型吡喃糖苷鍵。用Sephadex G-200 凝膠柱層析法測得金頂側耳、姬菇和毛頭鬼傘多糖的平均分子量分別約為382208、303774和523359。三種食用菌粗多糖總黃酮含量在3.0～7.0mg/g 間，總酚含量在2.0～5.0mg/g 間，蛋白含量在30～45％間，粗多糖精制后多糖含量上升30％左右，姬菇和毛頭鬼傘精多糖含量達70％以上。金頂側耳、姬菇

4、和毛頭鬼傘精多糖與粗多糖相比對O2－清除率分別提高62.5％,58.3％和51.5％；對OH·清除率分別提高33.1％,42.3％和33.2％；對DPPH·清除率分別提高56.0％,63.5％和60.3％。粗多糖經(jīng)精制后，多糖含量明顯提高，自由基清除能力明顯提高，表明多糖是清除自由基的主要功效成分。
　　 在分析了三種食用菌粗多糖的生物活性物質(zhì)、多糖含量和清除自由基活性后，研究了粗多糖的體內(nèi)降血糖和抗氧化作用。通過小鼠腹腔注射四

5、氧嘧啶建立動物糖尿病模型，以金頂側耳和姬菇粗多糖(400mg/kg)分別灌胃糖尿病小鼠28天，同時以降糖靈(100mg/kg)為藥物治療組，以正常小鼠為對照組，測定了0、6、14、21、28d 時空腹血糖值和28 d 時糖耐量。動物處死后，取血液測定小鼠糖化血紅蛋白(GHB)含量及血脂水平，并測定了小鼠血液和臟器的抗氧化指標。結果表明，與模型組比，灌胃食用菌粗多糖能明顯改善糖尿病“三多一少”病癥，能顯著降低空腹血糖值(P<0.01)和血

6、糖曲線下面積(AUC)(P<0.01)，給予兩種食用菌粗多糖后血糖下降百分率都大于15％，并使GHB含量恢復到正常水平(P>0.05)，還能使糖尿病小鼠膽固醇(TC)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量恢復到正常水平。金頂側耳和姬菇粗多糖能夠顯著提高糖尿病小鼠血液超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶（CAT）活力和非酶體系抗氧化能力，抑制丙二醛（MDA）
　　 形成，提高谷胱甘肽（GSH）含

7、量和總抗氧化能力（TAOC），同時也能顯著提高小鼠肝和腎的SOD、CAT活性及GSH含量，降低MDA含量。
　　 多糖是三種食用菌清除自由基的主要功效成分，且本研究已表明粗多糖具有一定的降血糖和抗氧化功效，在此基礎上將粗多糖進行提純，進一步研究精多糖的降血糖和抗氧化作用。
　　 通過小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立動物糖尿病模型，以金頂側耳、姬菇和毛頭鬼傘精多糖(低劑量組100mg/kg，高劑量組400mg/kg)分別灌胃糖尿病

8、小鼠30天，同時以優(yōu)降糖(100mg/kg)為藥物治療組，以正常小鼠和灌胃金頂側耳、姬菇和毛頭鬼傘精多糖(400mg/kg)正常小鼠為對照組，測定0、7、14、22、30 d 時空腹血糖值和30d 時糖耐量。動物處死后，取血液測定小鼠糖化血紅蛋白(GHB)含量、血脂指標及肝臟TG 水平，測定小鼠血液和臟器的抗氧化指標，并采用4％～35％的聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳分析抗氧化酶同工酶。結果表明：灌胃三種食用菌精多糖 30天后與模型組比能明顯改

9、善糖尿病“三多一少”病癥，能顯著降低空腹血糖值和AUC(P<0.01)，其中多糖高劑量組小鼠血糖下降百分率大于7％，多糖高劑量組的這些指標都達到了藥物組治療水平，并使GHB和肝糖原含量恢復到正常水平(P>0.05)。糖尿病小鼠甘油三酯(TG)、HDL-C和總脂(TL)含量在給予食用菌精多糖后能恢復到正常水平。與模型組相比，三種食用菌精多糖能顯著提高糖尿病小鼠血液和肝臟SOD、CAT、GSH-Px活力和非酶體系抗氧化能力，抑制MDA 形成