新敏熒光試劑合成及其在高效液相色譜中的應(yīng)用.pdf

1、高效液相色譜(HPLC)被認(rèn)為是迄今為止人類已經(jīng)掌握的對復(fù)雜混合物分離能力最有效的手段之一；而熒光檢測則被認(rèn)為是最靈敏的檢測手段之一。兩者的有機(jī)結(jié)合，可以滿足人們由常規(guī)及痕量分析向超痕量分析的要求。然而現(xiàn)實(shí)中大多數(shù)的物質(zhì)不發(fā)熒光或熒光較弱，采用化學(xué)衍生法成為行之有效的途徑。本文利用熒光標(biāo)記技術(shù)使本身不發(fā)熒光的化合物(如脂肪酸、脂肪胺等)轉(zhuǎn)化成發(fā)射熒光的衍生物，從而實(shí)現(xiàn)高靈敏熒光檢測。本文重點(diǎn)研究了以苯并吖啶酮和2-(1-芘基)苯并咪唑?yàn)?/p>

2、母體三種熒光標(biāo)記試劑的合成和表征，考察了熒光標(biāo)記試劑的光譜性質(zhì)，優(yōu)化了衍生反應(yīng)條件、色譜分離條件，并將建立的方法應(yīng)用于不同實(shí)際樣品的分析中。具體工作內(nèi)容如下： 第一章：簡述高效液相色譜的發(fā)展及其基礎(chǔ)知識，介紹熒光原理及熒光標(biāo)記法，分析總結(jié)熒光試劑衍生法的研究概況，并綜述熒光標(biāo)記試劑在羧酸類和胺類化合物的高效液相色譜分析中的應(yīng)用。 第二章：三種熒光標(biāo)記試劑：苯并吖啶酮-5-乙基對甲苯磺酸酯、2-(5-苯并吖啶酮)-乙酸和2

3、-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基-對甲苯磺酸酯的設(shè)計(jì)合成、結(jié)構(gòu)表征和光譜性質(zhì)研究。 第三章：兩種熒光標(biāo)記試劑BAETS和PBITS用于脂肪酸的高效液相色譜-質(zhì)譜分析。通過對衍生化條件和色譜分離條件的優(yōu)化，建立脂肪酸的柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法，并將方法應(yīng)用于木耳、狼毒根實(shí)際樣品的測定。結(jié)果表明，衍生反應(yīng)條件溫和，衍生產(chǎn)率高，該方法的線性范圍寬，重現(xiàn)性好，靈敏度高。 第四章：熒光標(biāo)記試劑PBITS用于膽汁酸的高