磁性納米復(fù)合顆粒的制備及其生物學(xué)應(yīng)用研究.pdf

1、近年來隨著納米技術(shù)的快速發(fā)展，磁性納米顆粒特別是磁性納米復(fù)合顆粒，因具有尺寸小、比表面積大、表面活性高、生物相容性好、比飽和磁化強(qiáng)度高及在外磁場作用下快速響應(yīng)等優(yōu)良特性，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中受到廣泛應(yīng)用，為生物分離和檢測方法提出了新的思路。
　　 本論文的主要內(nèi)容是以不同的方法制備磁性復(fù)合顆粒并將其用于全血DNA的提取，通過對提取條件的優(yōu)化，最終適用于全自動化核酸提取工作站。并結(jié)合本實驗室在磁分離、化學(xué)發(fā)光、PCR技術(shù)基礎(chǔ)上建立起來

2、的檢測新技術(shù)，以乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)DNA為檢測對象進(jìn)行了檢測方法的初探。具體內(nèi)容包括:
　　 1.通過共沉淀法和細(xì)微乳液法成功合成了聚苯乙烯(PS)包埋的磁性復(fù)合顆?！狥e3O4/PS，并在其表面修飾SiO2，得到了Fe3O4/PS/SiO2磁性復(fù)合顆粒。由結(jié)果可知，F(xiàn)e3O4/PS/SiO2磁性復(fù)合顆粒具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)，大小均一，平均粒徑為450 nm，且具有超順磁性，飽和磁化強(qiáng)度為1

3、7.32 emu/g。
　　 2.采用改進(jìn)的溶劑熱法制備Fe3O4磁性微球并經(jīng)過St(o)ber過程制備出Fe3O4/SiO2磁性復(fù)合顆粒，制備過程簡單，顆粒為圓球形，有明顯核殼結(jié)構(gòu)，平均粒徑為700 nm，大小均一，分散性好，具有超順磁性，飽和強(qiáng)度為43.274 emu/g。
　　 3.通過對全血DNA提取條件的優(yōu)化，得出結(jié)果:當(dāng)磁性復(fù)合顆粒用量為120μL(10 mg/mL)，裂解溫度為56℃，裂解時間為20 min

4、，洗脫體積為100μL時有最大提取量。并將優(yōu)化的體系與自動化核酸提取工作站相結(jié)合，提取的DNA經(jīng)凝膠電泳和PCR驗證，顯示良好的結(jié)果，為大樣本、高通量的提取全血DNA奠定了基礎(chǔ)。
　　 4.利用本實驗室已經(jīng)建立的基于磁分離、PCR擴(kuò)增和化學(xué)發(fā)光的核酸檢測方法，以乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）DNA為檢測對象，比較了兩種不同磁性復(fù)合顆粒在HBV DNA檢測上的效果，最終結(jié)果顯示，在相同的實驗條件下，F(xiàn)e