磁性納米粒子在生物學(xué)中的應(yīng)用.pdf

1、目的:為了探討磁性納米粒子(magneticnanoparticles)和修飾有端粒酶反義寡核苷酸的磁性納米粒子(magneticnanoparticlesmodifiedwithantisenseoligodeoxynucleotideofhumantelomerase)對HL-60白血病細胞在促進凋亡方面的影響。 方法:用原子力顯微鏡、熒光顯微鏡、透射電鏡、流式細胞儀等儀器設(shè)備檢測磁性納米粒子、修飾有端粒酶反義寡核苷酸的磁性

2、納米粒子誘導(dǎo)HL-60白血病細胞凋亡的發(fā)生；四氮唑藍比色法、瑞氏染色法、集落形成計數(shù)法觀察磁性納米粒子、修飾有端粒酶反義寡核苷酸的磁性納米粒子對HL-60白血病細胞生長抑制以及細胞增殖的影響；并用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測與凋亡相關(guān)的p53基因的表達，熒光量子點進行修飾有端粒酶反義寡核苷酸的磁性納米粒子在細胞中的定位；在實驗過程中，應(yīng)用Promega公司的mRNA分離器與自行研制的磁性納米mRNA分離器進行橫向比較分離效果

3、?？v橫結(jié)合闡明本研究應(yīng)用的磁性納米粒子在腫瘤細胞誘導(dǎo)凋亡上的生物學(xué)應(yīng)用。 結(jié)果:1.磁性納米粒子、修飾有端粒酶反義寡核苷酸的磁性納米粒子誘導(dǎo)HL-60細胞發(fā)生凋亡，原子力顯微鏡、光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡和透射電鏡下均觀察到HL-60細胞呈現(xiàn)典型的凋亡細胞的形態(tài)變化：細胞核固縮，核內(nèi)染色質(zhì)濃縮、凝聚、形成新月形或環(huán)狀結(jié)構(gòu)緊靠在細胞核膜邊緣，并形成凋亡小體。2.磁性納米粒子、修飾有端粒酶反義寡聚脫氧核苷酸的磁性納米粒子對HL-60腫瘤

4、細胞的生長和增殖有明顯的抑制作用，與對照組相比有顯著性差異(p＜0.01)，在劑量為0.8-8μmol/L范圍內(nèi)，抑制率隨劑量的增加而增加，當(dāng)劑量超過8μmol/L時，抑制率反而下降；3.磁性納米粒子、修飾有端粒酶反義寡聚脫氧核苷酸的磁性納米粒子可增強p53基因的表達活性，引起DNA降解損傷，反向調(diào)節(jié)細胞周期活動，促使細胞從G0期進入G1期，抑制腫瘤細胞的生長。4.修飾有端粒酶反義寡聚脫氧核苷酸的量子點能通過內(nèi)吞作用進入HL-60腫瘤細