納米粒子生物分子復(fù)合物在生物樣品分離純化及癌細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡中的應(yīng)用.pdf

1、自從費(fèi)曼提出納米科技的概念以來，納米技術(shù)受到了廣泛的關(guān)注并得到了迅速的發(fā)展。納米科學(xué)的發(fā)展帶動(dòng)了許多其他學(xué)科的發(fā)展，同時(shí)也產(chǎn)生了很多新興的交叉學(xué)科。納米技術(shù)與生物技術(shù)相結(jié)合所產(chǎn)生的納米生物技術(shù)是目前世界上的研究熱點(diǎn)課題，已經(jīng)有了很大的發(fā)展。本文主要研究了納米粒子與生物分子相結(jié)合形成的納米粒子生物分子復(fù)合物在生物體系中的應(yīng)用。 (1)將合成的超順磁性納米粒子γ-Fe<,2>O<,3>與不同類別特異性的單克隆抗體通過化學(xué)鍵合作用耦合

2、，得到不同種類的磁性納米粒子生物抗體復(fù)合物。進(jìn)一步將該復(fù)合物分別應(yīng)用于人臍帶血中造血干細(xì)胞CD34+的分離、純化和大腸桿菌O157：H7的分離與純化，運(yùn)用多種方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了表征。結(jié)果表明所制備的磁性納米粒子生物抗體復(fù)合物能夠有效地從臍帶血中將目標(biāo)造血干細(xì)胞CD34+分離出來，分離出來的目標(biāo)細(xì)胞仍然具有很好的生物活性和增殖能力；同樣該復(fù)合物能有效地將大腸桿菌O157：H7進(jìn)行富集，從而有利于進(jìn)一步的檢測(cè)。 (2)通過化學(xué)共沉

3、淀法合成磁性納米粒子，通過反相微乳液法在其表面包裹一層二氧化硅。再通過化學(xué)反應(yīng)在其表面修飾上具有活性的官能團(tuán)。將這樣的功能化磁性納米粒子應(yīng)用于傳統(tǒng)中藥中有效總蛋白成分的分離。結(jié)果表面，所制備的功能化磁性納米粒子能夠有效地從各種傳統(tǒng)中藥中將總蛋白分離出來，為生物學(xué)上各種蛋白的研究提供了技術(shù)手段。 (3)基于納米技術(shù)與生物學(xué)上反義技術(shù)的理論基礎(chǔ)知識(shí)，合成了不同發(fā)射波長的半導(dǎo)體納米粒子(量子點(diǎn))核酸復(fù)合物。a．將紅色量子點(diǎn)與特定序列的

4、反義核酸相連接得到量子點(diǎn)反義核酸復(fù)合物，該復(fù)合物與K-562癌細(xì)胞作用后，特異性地結(jié)合在細(xì)胞核部位，同時(shí)誘導(dǎo)該癌細(xì)胞的凋亡；b．將綠色量子點(diǎn)和紅色量子點(diǎn)分別與特定序列的反義核酸和隨機(jī)序列的無關(guān)核酸相結(jié)合得到兩種不同的量子點(diǎn)核酸復(fù)合物。將這兩種量子點(diǎn)核酸復(fù)合物同時(shí)與K-562癌細(xì)胞作用。利用激光共聚焦熒光顯微鏡等試驗(yàn)手段對(duì)結(jié)果進(jìn)行了表征。結(jié)果表明不同的量子點(diǎn)核酸復(fù)合物在細(xì)胞中的分布及作用位點(diǎn)是不一樣的，連有反義核酸的綠色量子點(diǎn)特異性的集中