FITC-SiO2復合納米粒子的制備及其在生物分析中的應用.pdf

1、近年來，納米發(fā)光復合材料倍受關注，并作為發(fā)光探針應用于各種生物檢測中。與傳統(tǒng)有機染料相比，發(fā)光納米粒子的發(fā)光更強、穩(wěn)定性更高。為了方便對納米粒子進行表面修飾，通常制成核殼型復合納米粒子，其中以二氧化硅為外殼的復合熒光納米粒子因具有良好的水溶性、生物親和性、易于制備、分離和表面修飾，作為標記物應用于生物分析，可以顯著提高檢測的靈敏度，有望發(fā)展成為一類新型的具有巨大發(fā)展前景的發(fā)光生物標記材料。
　　本研究采用反相微乳液法合成熒光素-二

2、氧化硅復合納米粒子(FITC/SiO2composite nanoparticles)，確定了前驅(qū)物(FITC-APS)的最佳加入量。研究結(jié)果表明，在常溫下，微乳液的最佳配比為正硅酸乙酯∶環(huán)己烷∶正己醇∶曲拉通=0.1∶10∶4∶4，合成的熒光素-二氧化硅復合納米粒子一周之后的熒光強度為原來的90％。對制備的納米粒子進行表征，TEM實驗表明合成粒子的分散性良好，合成粒子的粒徑在80nm左右，與粒度分布實驗結(jié)果基本一致。IR光譜表明，合成

3、粒子表面具有氨基。研究發(fā)現(xiàn)，能否形成穩(wěn)定的復合納米粒子，與殼層厚度沒有很大的關系，主要是由兩者的電性決定的。并不是所有的親水性材料都能直接通過微乳液法形成穩(wěn)定的復合納米粒子，但可以通過改變實驗條件調(diào)節(jié)相關材料的電性來實現(xiàn)。
　　用制備的納米粒子檢測牛血清白蛋白，確定了最佳檢測條件，在0.050-0.55μg/mL的濃度范圍內(nèi)，納米粒子的熒光強度與BSA的濃度有較好的線性關系，線性方程為y=578.42c+10.99，相關系數(shù)r=0

4、.9789，檢出限為14μg/L。對濃度為0.40mg/L的BSA進行了11次平行測定，RSD為2.5％。
　　在pH為8.50的磷酸緩沖溶液中，復合納米粒子可以與親和素通過靜電引力結(jié)合。被標記的親和素仍然保持原有的生物活性，并且和生物素存在特異性結(jié)合。以濾膜為載體，被標記的親和素-生物素復合物的熒光強度與親和素在0.2-1.4μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關系，回歸方程為y=355.91c+107.58，相關系數(shù)r=0.9