促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂乳中生長營養(yǎng)因子的研究.pdf

1、植物乳桿菌常存在于發(fā)酵的蔬菜和果汁中，大多數(shù)菌株可以從發(fā)酵的植物性產(chǎn)品和青貯飼料中分離得到，也是人體腸道主要的微生物。在人體腸道中，植物乳桿菌通過與病原菌競爭限制性營養(yǎng)素，抑制病原菌的生長，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)的組成，形成生物學(xué)屏障。同時(shí)，植物乳桿菌通過產(chǎn)生有機(jī)酸、細(xì)菌素、過氧化氫以及雙乙酰等代謝產(chǎn)物抑制其它細(xì)菌，調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的組成，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，降低膽固醇水平，緩解乳糖不耐癥及抑制腫瘤細(xì)胞的形成。植物乳桿菌ST-Ⅲ(CGMCC N

2、o.0847)是一株具有降低血清膽固醇能力的益生菌，前期研究結(jié)果表明，其在脫脂乳中生長緩慢、產(chǎn)酸能力弱。為了揭示影響植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂牛乳中生長的機(jī)理，本文對(duì)其生長限制因子進(jìn)行了初步的探索。
　　 首先，考察了多種碳源、氮源以及維生素等營養(yǎng)因子對(duì)其生長的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在脫脂乳中添加碳源、維生素、氨基酸對(duì)其生長及凝乳無顯著影響；添加魚蛋白胨可顯著促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂乳中生長和凝乳，活菌數(shù)最高可達(dá)1.4×109c

3、fu/mL，最高滴定酸度為60°T并使脫脂乳凝乳(37℃恒溫培養(yǎng)17 h)。因此，我們推測魚蛋白胨中可能存在促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂乳中生長的營養(yǎng)因子。
　　 魚蛋白胨經(jīng)過分子截留極限為5000 Da的膜超濾后，透過液保留促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂乳中生長和凝乳的作用。該透過液經(jīng)過Sephadex G-25和Sephadex G-15凝膠柱分離后，檢測洗脫液在220 nm處的光吸收，獲得一個(gè)可以促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂

4、乳中生長和凝乳的組分B33。
　　 將組分B33冷凍干燥處理后進(jìn)行紅外光譜掃描，組分B33在C-O鍵特征峰位表現(xiàn)較弱吸收，初步判斷組分B33為非多糖物質(zhì)。譜圖中NH3+的伸縮振動(dòng)、COO-申縮振動(dòng)、N-H伸縮振動(dòng)與彎曲振動(dòng)、N-H和O-H的伸縮振動(dòng)等特征吸收具有顯著的肽類物質(zhì)的特征，初步推斷組分B33中促進(jìn)植物乳桿菌ST-Ⅲ在脫脂乳中凝乳的物質(zhì)是肽類物質(zhì)。其次，LC-MS分析檢測出八種多肽組成。
　　 最后，選取一株凝乳