靜電分化法制備絲素納米顆粒及其作為順鉑控釋載體的研究.pdf

1、肺癌是威脅人類健康的重大疾病之一。順鉑是有效的抗腫瘤化療藥物。提高順鉑載體的靶向性，使順鉑高效、持續(xù)地發(fā)揮其生物學(xué)作用，并降低其對正常組織細(xì)胞的毒性，是肺癌等腫瘤化療領(lǐng)域的重要研究課題。本文采用無污染加工技術(shù)制備了具有較小粒徑的絲素蛋白納米顆粒，研究了制備條件與納米顆粒結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，并探討了該納米顆粒作為順鉑緩釋載體的特性及其對人肺腺癌細(xì)胞A549的誘導(dǎo)凋亡作用和對小鼠成纖維細(xì)胞L929的毒性。
　　首先，采用高壓靜電分化和冷凍

2、干燥相結(jié)合的技術(shù)制備了直徑可控的絲素蛋白納米顆粒。用掃描電鏡（SEM）觀察了絲素溶液濃度、電壓、溶液推注速度對納米顆粒的大小及形貌的影響。結(jié)果表明，該絲素納米顆粒濕態(tài)的平均直徑約為170-224 nm，干態(tài)的平均直徑約為53-86 nm。當(dāng)絲素溶液濃度或推注速度較小時，制備的納米顆粒的直徑也較小，當(dāng)溶液濃度或推注速度相對較大時，制備的納米顆粒的平均直徑較大。電壓相對較小（11、12 kV）時，制備的絲素納米顆粒的直徑較大，而當(dāng)電壓增大時

3、（13、14 kV），得到的納米顆粒直徑相對較小，但當(dāng)電壓進(jìn)一步增加至15 kV和16 kV時，分化出的納米顆粒直徑稍有增加，不均勻性也增大。
　　其次，利用絲素中的羧基與順鉑中的Pt-Cl之間的配位鍵交換反應(yīng)制備了載順鉑絲素納米顆粒，探討了順鉑/絲素比例分別為1/5和1/10時納米顆粒的包埋率、載藥率及體外釋藥率隨時間的變化規(guī)律。結(jié)果表明，順鉑/絲素比例為1/5時制得的納米顆粒的載藥率和包埋率均高于比例為1/10的納米顆粒。順鉑

4、/絲素比例為1/5的納米顆粒在最初的12 h內(nèi)有突釋現(xiàn)象，累積釋放率達(dá)36.7%，之后納米顆粒中的順鉑緩慢釋放。順鉑/絲素比例為1/10的納米顆粒中順鉑緩慢釋放，無突釋現(xiàn)象，15 d后累積釋放率小于1/5實驗組。
　　最后，分別研究了載順鉑絲素納米顆粒對人肺腺癌細(xì)胞A549的促凋亡作用及對小鼠成纖維細(xì)胞L929的毒性。隨著順鉑濃度的增加和培養(yǎng)時間的延長，順鉑誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的作用顯著加強。載順鉑絲素納米顆粒表現(xiàn)出與純順鉑相似的誘導(dǎo)A