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文檔簡(jiǎn)介
1、背景及目的:肝細(xì)胞癌(HCC)是世界范圍內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,發(fā)病率約占人類惡性腫瘤的4%,具有較高的發(fā)病率和死亡率,每年至少有315,000名患者死于肝癌。目前的治療手段以手術(shù)切除治療為主,但是由于其分子生物學(xué)和獨(dú)特的解剖學(xué)特性,手術(shù)切除率并不高,即使進(jìn)行手術(shù)治療,術(shù)后5年生存率也只有25%-29%,而且術(shù)后沒(méi)有其它較為有效的化療及其它輔助性治療手段。目前,肝癌的治療仍是世界性的難題。
研究發(fā)現(xiàn)KISS—1和COX-2基
2、因是腫瘤相關(guān)性基因,與腫瘤關(guān)系密切。其中KISS-1是一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,能編碼mestastin蛋白,該蛋白能與G-蛋白偶聯(lián)受體特異性結(jié)合,作用于細(xì)胞中的效應(yīng)分子,改變細(xì)胞內(nèi)信使的含量與分布,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)信使作用于相應(yīng)的靶分子,抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。大量研究發(fā)現(xiàn)KISS—1的低表達(dá)或表達(dá)缺失與多種腫瘤腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后關(guān)系密切。如:乳腺癌、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌等。而COX是合成前列腺素過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵限速酶,它有兩同工酶COX—
3、1和COX-2。正常狀態(tài)下,COX-2一般不表達(dá),只有當(dāng)細(xì)胞受到刺激時(shí),COX-2轉(zhuǎn)錄翻譯才開(kāi)始增多。在腫瘤細(xì)胞中,細(xì)胞處在一種非正常狀態(tài),COX-2呈高表達(dá)。研究顯示,COX-2在諸如:胃癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌等組織中呈高表達(dá)。它的高表達(dá)與腫瘤關(guān)系密切。
在我國(guó),肝癌的發(fā)生一般都伴有肝硬化,大都經(jīng)歷由正常肝臟到肝硬化,最終發(fā)展成肝癌的過(guò)程。為此,本實(shí)驗(yàn)擬采RT—PCR對(duì)KISS-1和COX-2從基因的水平檢測(cè)它們?cè)诎?/p>
4、組,癌旁肝硬化組和正常組的表達(dá)情況,分析它們?cè)诟伟┲邪l(fā)揮的作用及與腫瘤浸潤(rùn),轉(zhuǎn)移等方面的關(guān)系。
標(biāo)本收集與實(shí)驗(yàn)方法:
1.收集2009年5月-2010年7月間,鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院普外科,接受手術(shù)治療的病例標(biāo)本。收集的全部標(biāo)本符合實(shí)驗(yàn)要求:有詳細(xì)的臨床病歷資料和明確的病理論斷,且術(shù)前未做過(guò)放療,化療及其它輔助性的治療。標(biāo)本包括肝癌組(39例)(以下簡(jiǎn)稱為肝癌組)、癌旁肝硬化組(30例)(以下簡(jiǎn)稱為癌旁組)和正
5、常肝臟組(10例)。
2.采用RT—PCR對(duì)KISS-1和COX-2從基因的水平檢測(cè)它們?cè)诎┙M、癌旁組和正常組的表達(dá)情況,分析它們?cè)诟伟┲斜磉_(dá)的意義及與臨床病理學(xué)特征及分級(jí)等方面的關(guān)系。并對(duì)KISS-1和COX-2在癌組中的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。
3.使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,計(jì)量數(shù)據(jù)用(X)±s,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用方差分析、t檢驗(yàn)、LSD—t檢驗(yàn)和Pearson假設(shè)檢驗(yàn)。a=0.05,P<0.05有統(tǒng)計(jì)
6、學(xué)意義。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.KISS-1mRNA在所有的標(biāo)本中都有表達(dá)。在癌組中的表達(dá)水平明顯低于肝硬化組和正常組,都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而癌旁組和正常組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.COX-2mRNA在正常的肝臟組織中不表達(dá);在癌組中的表達(dá)水平明顯高于正常組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);也高于癌旁組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而肝硬化組的表達(dá)水平明顯高于正常組,且有
7、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.①KISS-1mRNA在肝癌中呈低表達(dá),而且其表達(dá)水平與患者的年齡、性別、HBsAg及腫物大小等無(wú)關(guān),其表達(dá)水平的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。但是與甲胎蛋白的水平、有無(wú)包膜,門(mén)靜脈癌栓及Edmenson分級(jí)有關(guān)(p<0.05)即AFP水平越高、沒(méi)有包膜、伴癌栓和分級(jí)越高,其表達(dá)水平越低,反之表達(dá)水平越高。
②COX-2mRNA在肝細(xì)胞癌腫呈高表達(dá),其表達(dá)水平與患者的年
8、齡、性別、AFP水平、有無(wú)包膜、是否伴門(mén)靜脈癌栓、HBsAg情況、腫物的大小和Edmenson分級(jí)等無(wú)關(guān)(p>0.05)。
4.KISS—1mRNA和COX-2mRNA在肝癌中的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.215,p<0.05)。
結(jié)論
1.KISS—1mRNA低表達(dá)與肝癌的進(jìn)展密切相關(guān),在腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。
2.COX-2mRNA的高表達(dá)與肝癌密切相關(guān),但與年齡
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