Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白在口腔鱗狀細胞癌中的表達及意義.pdf

1、目的：口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinomas OSCC)是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率較高。根據(jù)癌細胞的分化程度可分為高、中、低分化鱗狀細胞癌，它們均具有侵襲和轉(zhuǎn)移的特性。目前認為腫瘤是一種多基因性疾病，是一個多基因變異不斷累積的結(jié)果。已有研究表明，口腔鱗狀細胞癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移也涉及到癌基因激活及抑癌基因失活等多基因的變異。
　　 Fascin蛋白又稱為聚束蛋白，是一種肌動蛋白

2、結(jié)合蛋白，參與細胞的運動和黏附功能。它與F-肌動蛋白結(jié)合后的結(jié)構(gòu)加強了肌動蛋白細胞骨架，對細胞移動起著重要作用。研究發(fā)現(xiàn)Fascin蛋白的增加可引起腫瘤細胞膜表面突起增多，增殖旺盛，影響細胞粘附能力的改變，改變細胞與細胞外基質(zhì)的黏附能力，增強腫瘤細胞的運動能力，以及通過細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等途徑增強腫瘤組織的局部侵襲轉(zhuǎn)移能力，F(xiàn)ascin蛋白在多種腫瘤組織和癌前病變組織中呈現(xiàn)上調(diào)表達。
　　 E-鈣粘蛋白(E-cadhernin，E

3、-cad)編碼基因定位于16號染色體q22.1附近，是介導(dǎo)上皮細胞間粘連的一種細胞粘附分子，對Ca2+有高度敏感性。在生理條件下E-cad對維持組織結(jié)構(gòu)形態(tài)、調(diào)節(jié)細胞運動、及參與維持細胞之間、細胞與基質(zhì)之間的黏附力都具有重要作用。目前研究認為E-cad是一種抑癌基因，當其在腫瘤組織中活性正常時，腫瘤細胞不易從原發(fā)灶上脫落，E-cad通過加強細胞間的黏附力及抑制細胞增殖來發(fā)揮抑癌功能；而其活性降低或失活時則導(dǎo)致細胞黏附功能下降從而促進腫瘤

4、細胞轉(zhuǎn)移。研究表明E-cad的表達下降與腫瘤的分化程度、發(fā)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生及預(yù)后密切相關(guān)。
　　 近年來研究發(fā)現(xiàn)，很多人類腫瘤出現(xiàn)Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白的異常表達，并且與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移以及患者的預(yù)后密切相關(guān)。本研究通過免疫組化的方法檢測二者在口腔鱗狀細胞癌中的表達及與口腔鱗狀細胞癌組織學分級的關(guān)系，為口腔鱗狀細胞癌的預(yù)后判斷及臨床治療提供依據(jù)，并進一步探討二者作為判斷患者預(yù)后標記物和治療靶點的前景。
　　 方

5、法：本試驗選取存檔的60例口腔鱗狀細胞癌標本蠟塊和40例口腔正常粘膜組織蠟塊，分為試驗組(OSCC組)和對照組(NM組)?？谇击[狀細胞癌標本均進行HE染色后經(jīng)有經(jīng)驗的病理醫(yī)師閱片后確診，其中高分化鱗癌31例，中分化鱗癌21例，低分化鱗癌8例。將每個蠟塊切為4-5μm的切片，共切4張，1張HE染色，1張Fascin蛋白染色，1張E-鈣粘蛋白染色，1張作為陰性對照。用已知的Fascin蛋白陽性的胃癌標本和已知的E-鈣粘蛋白陽性正常腸粘膜標本

6、作為陽性對照，以PBS代替-抗作為陰性對照，運用SP免疫組織化學法進行試驗。
　　 Fascin蛋白染色判定參照Hashimoto的標準，以細胞膜和細胞漿顯示彌漫性棕黃色顆粒為陽性染色，每張切片隨機計數(shù)10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞。據(jù)陽性細胞百分率判定：(1)未見棕黃色顆粒為陰性；(2)<25％為弱陽性(+)；(3)25％-75％為陽性(++)；(4)>75％為強陽性(+++)。
　　 E-鈣粘蛋白以細胞膜上

7、出現(xiàn)棕黃色膜性染色作為正常表達的陽性標記。而位于細胞漿中或胞膜與胞漿共同有連續(xù)線狀或斑點狀黃色至棕黃色顆粒沉積者為異常陽性表達，無染色者為陰性表達。每張切片隨機計數(shù)10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞。據(jù)陽性細胞百分率判定：(1)陰性：無染色，陽性細胞數(shù)<25％；(2)弱陽性：胞漿染色淺，陽性細胞數(shù)26％～50％；(3)中度陽性：胞膜胞漿混合染色，陽性細胞數(shù)51％-75％；(4)強陽性：胞膜連線狀均勻染色，陽性細胞數(shù)>75％。

8、>　　 采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析，試驗結(jié)果采用x2檢驗，P<0.05有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：1.Fascin蛋白的表達：對照組中，40例正?？谇徽衬吮揪赎幮员磉_，試驗組中，60例口腔鱗狀細胞癌標本共41例呈現(xiàn)陽性表達，陽性率為68.33％，陽性率顯著高于對照組。經(jīng)統(tǒng)計學分析x2值為46.33，P<0.01，有統(tǒng)計學意義。
　　 2.E-鈣粘蛋白的表達：對照組中，40例正常口腔粘膜標本有38例呈強陽

9、性表達，2例呈異常陽性，異常陽性率為5％，試驗組中，60例口腔鱗狀細胞癌標本有21例呈強陽性表達，39例呈現(xiàn)異常陽性表達，異常陽性率為65％顯著高于對照組。經(jīng)統(tǒng)計學分析x2值為35.72，P<0.01，有統(tǒng)計學意義。
　　 3.Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白的表達與臨床病理指標的關(guān)系：二者的表達均與鱗癌的組織學分級具有相關(guān)性，鱗癌的分化越低，F(xiàn)ascin蛋白的陽性表達和E-鈣粘蛋白的異常陽性率表達越高P<0.05，而與患者性別、

10、年齡無顯著相關(guān)性P>0.05。
　　 結(jié)論：1.在口腔鱗狀細胞癌標本中Fascin蛋白表達陽性率顯著高于在正常粘膜中的表達，且與口腔鱗狀細胞癌的病理分級相關(guān)。提示Fascin蛋白可能在口腔鱗狀細胞癌的進展、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮一定的作用。
　　 2.在口腔鱗狀細胞癌標本中E-鈣粘蛋白的膜性表達陽性表率明顯低于正常粘膜中的表達，且與口腔鱗狀細胞癌的病理分級相關(guān)。提示E-cad在口腔鱗狀細胞癌的進展、轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮著重要的作用