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1、免疫分析方法在抗原-抗體特異性反應(yīng)的原理上建立起來的分析方法?;诿庖叻治龇ê碗娀瘜W(xué)傳感器結(jié)合的電化學(xué)免疫傳感器因其靈敏度高,分析速度快,操作簡單,價格低廉及選擇性好等優(yōu)點,在臨床診斷、生物分析、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域得到了高度重視和廣泛應(yīng)用。電流型和電位型免疫傳感器是根據(jù)抗原.抗體結(jié)合前后的電流、電位的變化來檢測生物分子的濃度。傳感器的性能主要取決于生物活性物質(zhì)的固定方法,因此解決把生物活性物質(zhì)固定在電極上并能保持其生物活性的方法成為當(dāng)今電化
2、學(xué)免疫傳感器研究中的重點。納米材料因其具有良好的吸附能力和生物兼容性等特點已被廣泛應(yīng)用到免疫傳感器中作為生物活性物質(zhì)的載體,且很大程度上提高了傳感器的性能。本論文基于此考慮,研究了一系列基于納米材料為載體的電化學(xué)免疫傳感器。 1.電沉積普魯士藍(lán)和雙層納米金修飾的免疫傳感器的研究 用[AuCl4]—和Fe3+/[Fe(CN)6]3—派生物修飾電極表面制備簡單且靈敏的電化學(xué)免疫傳感器。電化學(xué)還原[AuCl4]—在玻碳電極(G
3、CE)表面沉積上一層多孔納米金(NG),然后再電沉積上一層普魯士藍(lán)(PB),隨之電沉積上第二層納米金以固定癌胚抗體(anti—CEA)制備出一種免疫傳感器。雙層多孔納米金顆粒的引入增大了生物分子的固定量,且提高了免疫傳感器的靈敏度。PB,一種很好的氧化還原探針,廣泛用于電化學(xué)分析測定中。在優(yōu)化的條件下,所制電極的線性范圍為3.0~80.0ng/mL,檢測限為0.9ng/mL(S/N=3)。而且,此免疫電極的選擇性、重現(xiàn)性及穩(wěn)定性都是可以
4、接受的。 2.三維立體SiO2@Au和聚硫堇修飾的金電極用于檢測CA15-3的研究 基于三維立體SiO2@Au納米顆粒和聚硫堇(PTH)膜修飾金電極制備新型先進(jìn)的免疫傳感器。并利用交流阻抗測試系統(tǒng)(EIS)和循環(huán)伏安法(CV)對免疫傳感器的制備、性能及檢測癌抗原15-3(CA15-3)中的相關(guān)特性進(jìn)行了研究。基于三維立體SiO2@Au納米顆粒的免疫傳感器提供了更多的活性位點和更好的吸附特性以固定CA15-3抗體來選擇CA
5、15-3抗原。在優(yōu)化的條件下,應(yīng)用于多個標(biāo)準(zhǔn)樣品檢測時,修飾好的免疫傳感器表現(xiàn)出良好的線性和靈敏度,線性范圍為1~8和8~250U/mL,檢測限為0.42U/mL(S/N=3)。更重要的是,此方法可以延伸至其他抗原或生物分子的檢測。 3.基于PVC和聚乙烯亞胺復(fù)合膜修飾的電位型免疫傳感器的研究 基于聚四氯乙烯和聚乙烯亞胺復(fù)合膜電極吸附納米金以固定抗體的癌抗原125(CA125)制備出新型的電位型免疫傳感器。所修飾免疫傳感
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