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文檔簡介
1、抗體在固體表面的固定化是成功構(gòu)建免疫傳感器的關(guān)鍵步驟,不同的固定化方法對(duì)轉(zhuǎn)換器表面上的抗體—抗原反應(yīng)將產(chǎn)生嚴(yán)重影響。近年來,人們將納米技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物傳感器的研究,利用貴金屬納米粒子(金、銀、鉑)、炭納米材料、磁性納米材料、自組裝單分子膜構(gòu)建免疫傳感器已成為當(dāng)今生物傳感器研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)課題。本文主要研究了金包覆普魯士藍(lán)納米粒子、蛋白質(zhì)A在電位型IgG免疫傳感器中的應(yīng)用,并研究了對(duì)羧基苯硫酚自組膜表面分子間氫鍵對(duì)免疫傳感器性能的影響。<
2、br> (1)金包覆磁性普魯士藍(lán)納米粒子的制備及其在電位型免疫傳感器中的應(yīng)用首次利用四氧化三鐵納米粒子(Au@Fe3O4)制備了金包覆磁性普魯士藍(lán)納米粒子(Au@MPBNPs)。將Au@MPB NPs和Au@Fe3O4共同固定在磁性炭糊電極(MCPE)上,再通過金與Ab分子上氨基的鍵合作用,將羊抗小鼠IgG(Anti—IgG)固定到MCPE表面,研制了一種性能優(yōu)良的電位型免疫傳感器(Ab/Au@Fe3O4/Au@PB/MCPE)。
3、在2×10-5~1×104ng/ml濃度范圍內(nèi),該傳感器的響應(yīng)電位與抗原(小鼠IgG)濃度的對(duì)數(shù)呈良好的線性關(guān)系,其線性方程為y=-22.89x-122.9,檢測(cè)下限為3.1×10-4 ng/ml,響應(yīng)時(shí)間為8 min。該傳感器的制備方法簡單,無需標(biāo)記過程,成本低廉,響應(yīng)靈敏,性能穩(wěn)定,具有潛在的應(yīng)用前景,對(duì)制備其他類型免疫傳感器具有重要參考價(jià)值。
(2)基于抗體定向固定化的電位型免疫傳感器的研究利用蛋白質(zhì)A(PrA)能夠
4、定向固定抗體的功能,制備了一種高度靈密的免疫傳感器(Ab/PrA/Au@Fe3O4/Au@MPB/MCPE)。在優(yōu)化檢測(cè)條件下,該傳感器檢測(cè)游離小鼠IgG的線性方程為y=-39.89x-204.41、響應(yīng)時(shí)間為6 min,檢測(cè)范圍為2.0×10-5~1.0×104 ng/ml,檢測(cè)下限為2.5×10-4 ng/ml,表明蛋白質(zhì)A定向固定抗體可大大提高免疫傳感器的靈敏度。
(3)對(duì)羧基苯硫酚自組膜表面分子間氫鍵對(duì)免疫傳感器性
5、能的影響首先在金電極(Au)上制備羧基苯硫酚自組膜(4-MBA SAM),進(jìn)而利用偶聯(lián)法固定抗體(Ab),制備了一種免疫傳感器(Ab/4-MBA SAM/GE)??疾榱瞬煌琾H下制備的4-MBA SAM以及混合硫醇SAM對(duì)Ab/4-MBA SAM/GE性能的影響。結(jié)果表明,在pH3.0的醋酸鹽緩沖溶液中制備4-MBA SAM所得到的Ab/4-MBA SAM/GE性能最好,其線性方程為y=6.04x+6.53,檢測(cè)范圍為4×10-4~1×
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