微流控芯片葡萄糖電化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)集成方法研究.pdf

1、葡萄糖生物傳感器是檢測(cè)葡萄糖濃度最常用的方法，微型化和便攜化是其發(fā)展的一個(gè)重要方向。微流控芯片技術(shù)的發(fā)展為生物傳感器的小型化及試樣與試劑消耗的降低提供了條件。本論文對(duì)微流控芯片葡萄糖電化學(xué)流動(dòng)分析系統(tǒng)的集成特性進(jìn)行了改進(jìn)，通過將葡萄糖氧化酶固定于微流控芯片通道內(nèi)壁的方法提高了系統(tǒng)的集成性;采用兩電極電化學(xué)檢測(cè)方法使系統(tǒng)的集成性得到了進(jìn)一步提高，系統(tǒng)成功地用于人血血漿中葡萄糖含量的測(cè)定。
　　利用共價(jià)鍵合法將葡萄糖氧化酶(GOD)固

2、定在玻璃質(zhì)微流控芯片通道內(nèi)壁上，使其既作為樣品流通通道，同時(shí)作為微型酶反應(yīng)器和電化學(xué)檢測(cè)單元。將該微流控芯片與注射泵連接，實(shí)現(xiàn)了對(duì)葡萄糖的流動(dòng)檢測(cè)。用電化學(xué)檢測(cè)方法測(cè)得固定化酶的表觀米氏常數(shù)(Km)為10mmol/L，在+0.5 V vs.Ag/AgCl，葡萄糖濃度在1.0×10-4～5.0×10-3 mol/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性(r=0.9989)，檢出限為5.0×10-5 mol/L(S/N=3)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.7％

3、(n=7)，在三天之內(nèi)沒有明顯的酶流失現(xiàn)象。該方法實(shí)現(xiàn)了微酶反應(yīng)器與電化學(xué)檢測(cè)單元在同一微流控芯片上的集成，并成功地用于葡萄糖的流動(dòng)檢測(cè)。
　　無需芯片外的Ag/AgCl參比電極，直接將集成在芯片通道內(nèi)的兩個(gè)鉑電極分別作為工作電極和對(duì)電極，對(duì)電極兼作參比電極，建立了兩電極電化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，同樣實(shí)現(xiàn)了葡萄糖的流動(dòng)檢測(cè)。用該方法測(cè)得毛細(xì)管固定化酶表觀米氏常數(shù)(Km)為24mmol/L，在+0.7 V vs.Pt，葡萄糖濃度在2.0×10