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文檔簡介
1、本文研究目的:采用幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)國際標(biāo)準(zhǔn)株NCTC11637感染Balb/c小鼠,觀察H.pylori感染初期小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的變化并測(cè)定小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表達(dá),以探討H.pylori感染對(duì)Balb/c小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞凋亡增殖及COX-2表達(dá)的影H向,揭示H.pylori的某些致病機(jī)制。 研究方法:將4
2、0只Balb/c小鼠隨機(jī)分為4組,每組10只,第1組為對(duì)照組,第2、3、4組為實(shí)驗(yàn)組;用布氏肉湯液體培養(yǎng)基配制新鮮H.pylori菌懸液(1.0×10<'9>CFU/ml);第1組灌胃布氏肉湯液體培養(yǎng)基,0.3 ml/只/天,連續(xù)5天;第2、3、4組灌胃新鮮H.pylori菌懸液,0.3 ml/只/天,連續(xù)5天;于末次灌胃后第10、10、24、32天分別將笫1、2、3、4組小鼠處死,進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):(1)用快速尿素酶試驗(yàn)、Warthin-
3、Starry銀染和H.pylori培養(yǎng)做小鼠的H.pylori感染診斷:(2)用免疫組化比較各組小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞COX-2的表達(dá)量;(3)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞凋亡率及增殖指數(shù)(PI)。 研究結(jié)果: (1)按照H.pylori感染的科研診斷標(biāo)準(zhǔn):第1組有0/10只,第2組有10/10只,第3組9/10只,第4組8/10只小鼠檢測(cè)到H.pylori感染;隨著時(shí)間的延長,H.pylori感染率逐漸下降;
4、 (2)免疫組化結(jié)果顯示:隨著感染時(shí)間的延長,小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞COX-2表達(dá)量有升高趨勢(shì),第1組與第2、3、4組的表達(dá)量有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),第2組與第3、4組表達(dá)量也有明顯差異(P<0.01),但第3、4組間無明顯差異(P>0.05); (3)細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果:隨著感染時(shí)間的延長,小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞凋亡率有升高趨勢(shì),且各組凋亡率兩兩比較都有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);(4)細(xì)胞增殖檢測(cè)結(jié)果:隨著感染時(shí)間的
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