幽門螺桿菌對胃粘膜端粒酶活性的影響及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的:研究胃癌及胃癌前病變組織端粒酶催化亞單位的表達(dá)與幽門螺桿菌感染的相關(guān)性,了解幽門螺桿菌感染對端粒酶催化亞單位表達(dá)的影響及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系,探討端粒酶催化亞單位與細(xì)胞凋亡調(diào)控基因的關(guān)系,并就端粒酶與bcl-2基因間的調(diào)控關(guān)系進(jìn)行研究,旨在揭示Hp、端粒酶和細(xì)胞凋亡之間的相關(guān)性,探討端粒酶的激活機(jī)制及意義,為闡明Hp的致癌機(jī)理提供理論依據(jù).方法:選擇64例慢性胃炎及胃癌患者為研究對象,其中慢性胃炎伴萎縮者16例,伴腸化生者15例,伴

2、中、重度異型增生者14例,胃癌19例.采用快速尿素酶試驗(yàn)、Warthin-Starry銀染色檢測幽門螺桿菌,采用Sp法檢測Htert、bcl-2、c-myc蛋白表達(dá),采用TUNEL染色法原位檢測細(xì)胞凋亡.在Hp濾液誘導(dǎo)前提下,采用流式細(xì)胞儀檢測抑制bcl-2基因表達(dá)對SGC7901胃癌細(xì)胞Htert蛋白表達(dá)的影響,以及抑制Htert基因表達(dá)對SGC7901胃癌細(xì)胞bcl-2蛋白表達(dá)的影響.結(jié)果:(1)萎縮性胃炎、腸化生、異型增生和胃癌組

3、織Htert蛋白表達(dá)率及中等陽性、強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為25.00﹪、46.67﹪、64.29﹪、78.95﹪和6.25﹪、13.33﹪、28.58﹪、52.63﹪,均呈遞增趨勢.胃癌組織Htert蛋白的表達(dá)率和中等、強(qiáng)陽性表達(dá)率均顯著高于異型增生、腸化生和萎縮性胃炎 (P<0.05),異型增生組織顯著高于腸化生和萎縮性胃炎 (P<0.05),腸化生組織顯著高于萎縮性胃炎 (P<0.05).Hp陽性患者Htert蛋白表達(dá)率為77.42﹪,顯

4、著高于Hp陰性患者(33.33﹪,P<0.01).(2)萎縮性胃炎、腸化生、異型增生和胃癌組織細(xì)胞凋亡指數(shù)分別為11.54±2.28、17.05±2.88、7.41±1.32和5.03±2.23.胃癌組織細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于異型增生、腸化生和萎縮性胃炎(P<0.05),異型增生組織細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于腸化生和萎縮性胃炎(P<0.05),腸化生組織細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于萎縮性胃炎(P<0.05).Htert蛋白陽性患者細(xì)胞凋亡指數(shù)為8.45

5、±5.30﹪,顯著低于Htert蛋白陰性患者(11.86±4.24﹪,P<0.05).Hp陽性伴Htert蛋白陽性患者細(xì)胞凋亡指數(shù)為9.57±5.01顯著高于Hp陰性伴Htert蛋白陽性患者(6.01±5.31,P<0.05).(3)萎縮性胃炎、腸化生、異型增生和胃癌組織bcl-2蛋白表達(dá)率分別為31.25﹪、53.33﹪、57.14﹪和84.21﹪,呈遞增趨勢.胃癌組織bcl-2蛋白表達(dá)率顯著高于異型增生、腸化生和萎縮性胃炎(P<0.

6、05),異型增生組織顯著高于萎縮性胃炎(P<0.05).腸化生組織顯著高于萎縮性胃炎(P<0.05).Bcl-2蛋白陽性患者Htert蛋白表達(dá)率為71.43﹪,顯著高于bcl-2蛋白陰性患者(34.44﹪,P<0.01).萎縮性胃炎、腸化生、異型增生和胃癌組織c-myc蛋白表達(dá)率分別為25﹪、53.33﹪、64.29﹪和79.85﹪,呈遞增趨勢.胃癌組織c-myc蛋白表達(dá)率顯著高于異型增生、腸化生和萎縮性胃炎(P<0.05),異型增生組

7、織顯著高于腸化生和萎縮性胃炎(P<0.05),腸化生組織顯著高于萎縮性胃炎(P<0.05).C-myc蛋白陽性患者Htert蛋白表達(dá)率為77.78﹪,顯著高于c-myc蛋白陰性患者(25.00﹪,P<0.01).(4) SGC7901胃癌細(xì)胞對照組表達(dá)Htert和 bcl-2蛋白的陽性細(xì)胞數(shù)和熒光強(qiáng)度顯著低于經(jīng)Hp培養(yǎng)濾液誘導(dǎo)的SGC7901胃癌細(xì)胞組.Hp培養(yǎng)濾液誘導(dǎo)下,抑制bcl-2基因表達(dá)后SGC7901胃癌細(xì)胞組表達(dá)Htert蛋

8、白的陽性細(xì)胞數(shù)和熒光強(qiáng)度顯著低于經(jīng)Hp培養(yǎng)濾液誘導(dǎo)的SGC7901胃癌細(xì)胞組(P<0.05),但顯著高于SGC7901胃癌細(xì)胞對照組(P<0.05).在Hp培養(yǎng)濾液誘導(dǎo)前提下,抑制Htert基因表達(dá)后SGC7901胃癌細(xì)胞組表達(dá)bcl-2蛋白的陽性細(xì)胞數(shù)和熒光強(qiáng)度與經(jīng)Hp培養(yǎng)濾液誘導(dǎo)的SGC7901胃癌細(xì)胞組無顯著差異,但顯著高于SGC7901胃癌細(xì)胞對照組(P<0.05).結(jié)論:(1)胃癌前病變至胃癌的演化過程中,Htert蛋白陽性表

9、達(dá)率及表達(dá)強(qiáng)度逐漸增加,端粒酶激活可能參與了胃粘膜細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的全過程.Hp感染與端粒酶活性密切相關(guān),Hp感染可能是胃粘膜上皮細(xì)胞端粒酶激活的主要機(jī)制之一,端粒酶激活可能是Hp致癌機(jī)制之一.(2)端粒酶激活抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞永生化.Hp感染既可誘導(dǎo)胃粘膜細(xì)胞凋亡,又可以激活端粒酶,引發(fā)細(xì)胞永生化,破壞了胃粘膜上皮的穩(wěn)定性,增加了癌變的危險(xiǎn)性,這可能是胃粘膜細(xì)胞癌變的主要機(jī)制之一.(3) 胃癌發(fā)生過程中,端粒酶與bcl-2和c-myc

10、基因均可能發(fā)揮了重要作用;端粒酶活性與bcl-2和c-myc表達(dá)呈正相關(guān),bcl-2和c-myc表達(dá)增加可能參與了胃粘膜上皮細(xì)胞端粒酶激活的調(diào)控.(4)Hp濾液可以誘導(dǎo)SGC7901胃癌細(xì)胞Htert、bcl-2蛋白表達(dá)增加.Bcl-2基因正向調(diào)控Htert蛋白表達(dá),bcl-2表達(dá)上調(diào)可能是Hp激活端粒酶的主要途徑之一.端粒酶的激活不完全依賴于bcl-2途徑,還存在其它的調(diào)控因素.結(jié)果表明Hp感染促進(jìn)bcl-2表達(dá)、激活端粒酶,可能是H