丁酸鈉抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究及分子機(jī)制探討.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文丁酸鈉抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究及分子機(jī)制探討姓名：劉成霞申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：張尚忠20050101大約15％的作用。一般認(rèn)為高脂肪膳食與食物纖維不足是主要相關(guān)因素，攝入多量不消化淀粉和食物纖維可以減少甚至預(yù)防結(jié)直腸癌的發(fā)生。大量流行病學(xué)資料和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持是短鏈脂肪酸，主要是丁酸介導(dǎo)了這種保護(hù)機(jī)制。隨著表遺傳學(xué)研究的進(jìn)展，作為飲食纖維在結(jié)腸細(xì)菌的發(fā)酵產(chǎn)物，丁酸及其鹽類化合物的抗腫瘤作用重新引起腫瘤研

2、究者的興趣。丁酸鈉(sodiumbutyrateNaBT)是食物纖維在結(jié)腸內(nèi)發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的一種無毒的四碳脂肪酸鹽，是一種重要的腸道粘膜營養(yǎng)劑。許多體外研究證實(shí)，丁酸鈉可以對多種體外培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生作用，包括抑制細(xì)胞增生，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等，因而作為一種極具潛力的抗癌藥物，越來越受到腫瘤研究者的關(guān)注。盡管國內(nèi)外對丁酸鹽的抗腫瘤作用進(jìn)行了一些研究，但是，丁酸鈉的作用機(jī)制還有很多是未知的，關(guān)于丁酸鹽與p53靶基因p21wafl，Gadd

3、45和Bax基因表達(dá)的關(guān)系研究較少，尤其缺乏對其抗腫瘤作用進(jìn)行系統(tǒng)的體內(nèi)外聯(lián)合研究。本研究擬從體內(nèi)、外兩方面觀察丁酸鈉的抗腫瘤作用，并通過分析丁酸鈉對p53的三個(gè)主要靶基因，p21wafl、Bax和Gadd45的調(diào)控，初步探討其抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增生、誘導(dǎo)其凋亡的分子機(jī)制。通過本實(shí)驗(yàn)，將進(jìn)一步豐富丁酸鹽的抗癌機(jī)制，為丁酸及其鹽類化合物作為化學(xué)預(yù)防劑，對人類大腸癌進(jìn)行化學(xué)防治研究提供理論依據(jù)，并為高丁酸膳食預(yù)防大腸癌的發(fā)生提供實(shí)驗(yàn)資料。目的實(shí)

4、驗(yàn)一：1、檢測丁酸鈉對攜帶野生型p53基因的結(jié)腸癌Lovo細(xì)胞和突變型p53基因的結(jié)腸癌HT29細(xì)胞，以及二倍體人胚腎293細(xì)胞的生長抑制和促凋亡作用，觀察丁酸鈉的促凋亡作用是否具有腫瘤細(xì)胞選擇性：2、觀察丁酸鈉對上述三種細(xì)胞中p53的三個(gè)主要靶基因，p21wafl、Gadd45和Bax的調(diào)控作用，探討其抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增生、誘導(dǎo)其凋亡的分子機(jī)制，并進(jìn)一步觀察這種抗腫瘤作用是否具有p53依賴性；實(shí)驗(yàn)二：1、觀察赫酸二甲基胼誘發(fā)昆明小鼠大腸