高原地區(qū)與平原地區(qū)慢性牙周炎患者牙周致病菌差異的初步研究.pdf

1、目的及意義:
　　慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)是導(dǎo)致成年人失牙的最主要原因,在所有牙周疾病中發(fā)病率最高,是一種由牙菌斑的微生物為始動(dòng)因素的慢性感染性疾病。目前研究發(fā)現(xiàn)與慢性牙周炎發(fā)生相關(guān)的牙周致病菌有十余種[1]。牙周致病菌及其毒性產(chǎn)物可直接破壞牙周組織,并激活宿主免疫應(yīng)答,造成牙周支持組織免疫損傷,導(dǎo)致慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展[2]。宿主過(guò)度的免疫應(yīng)答以及釋放大量炎性因子,是導(dǎo)致慢性牙周炎進(jìn)一步發(fā)展

2、的重要原因。目前有研究表明[3],與慢性牙周炎相關(guān)的炎性細(xì)胞因子包括前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1等。
　　居住于高原地區(qū)的人群中,慢性牙周炎有較高的發(fā)病率,并且其進(jìn)展速度快,牙周支持組織的破壞程度較平原地區(qū)更為嚴(yán)重;平原慢性牙周炎患者進(jìn)入高原后,會(huì)造成牙齒的過(guò)早脫落[4]。有研究結(jié)果表明,這可能與牙周致病菌的種類、分布等受到高原特殊環(huán)境的影響有關(guān)。但目前高原地區(qū)慢性牙

3、周炎的牙周致病菌特點(diǎn)與平原地區(qū)有何差異還少見(jiàn)報(bào)道。
　　本研究采用分層抽樣方法,在海拔500米地區(qū)對(duì)262名受檢者以及海拔3800米地區(qū)對(duì)357名受檢者進(jìn)行牙周健康狀況調(diào)查。分別選取50位CP患者和50位牙周健康(Periodontal health,PH)者,分組收集其唾液和齦下菌斑樣本。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法檢測(cè)高原地區(qū)受檢者唾液中PGE2的含

4、量,分析其與臨床牙周指數(shù)的相關(guān)性;使用以16S rRNA為基礎(chǔ)的聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)技術(shù),檢測(cè)高原及平原受檢者唾液和齦下菌斑中6種可疑牙周致病菌包括中間普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、福賽斯坦納菌(Tannerella forsythensis,Tf)、齒垢密螺旋體(Treponem

5、a denticola,Td)、伴放線聚集桿菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)和具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)的陽(yáng)性檢出率,分析高原地區(qū)與平原地區(qū)慢性牙周炎牙周致病菌的差異,初步探討高原地區(qū)慢性牙周炎的發(fā)病機(jī)制[1]。
　　研究方法及步驟:
　　1、研究對(duì)象
　　采用分層抽樣方法[1],在重慶第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院口腔科門診(海拔50

6、0米左右)對(duì)包括就診患者、醫(yī)院工作人員和本院學(xué)生在內(nèi)的262名受檢者進(jìn)行牙周健康狀況調(diào)查;同時(shí)在西藏林周縣人民醫(yī)院口腔科門診及西藏軍區(qū)駐拉薩308團(tuán)(海拔3800米左右)對(duì)包括就診患者、醫(yī)院工作人員和駐拉薩官兵在內(nèi)的357名受檢者進(jìn)行牙周健康狀況調(diào)查。并分別選取50位慢性牙周炎患者和50位牙周健康者,分組收集其唾液和齦下菌斑樣本。
　　2、牙周健康狀況調(diào)查及臨床牙周檢查請(qǐng)受檢查者填寫牙周健康調(diào)查表問(wèn)卷調(diào)查部分。使用平面口鏡、牙周袋

7、刻度探針和普通探針,以視診結(jié)合探診的方式對(duì)受檢者進(jìn)行牙周檢查,記錄牙周臨床指標(biāo)。
　　3、樣本采集
　　采用吸取法收集1ml唾液置于無(wú)菌微量離心(eppendorf,EP)管;
　　使用無(wú)菌棉球行口腔隔濕,去除指數(shù)牙表面的牙結(jié)石以及齦上菌斑,于牙周袋底刮取齦下菌斑,收集后置于無(wú)菌EP管。
　　4、檢測(cè)高原地區(qū)受檢者唾液中PGE2含量用ELISA法檢測(cè)高原地區(qū)受檢者唾液中PGE2含量。
　　5、牙周致病菌檢測(cè)

8、采用PCR方法對(duì)各組樣本中6種細(xì)菌即Pg、Aa、Td、Fn、Pi和Tf進(jìn)行DNA分析,計(jì)算6種細(xì)菌陽(yáng)性檢出率。
　　6、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS13.3統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)計(jì)量資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),對(duì)計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)分析方法分析細(xì)菌陽(yáng)性檢出率及PGE2水平與牙周臨床指數(shù)的關(guān)系。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)果:
　　1、抽樣調(diào)查結(jié)果顯示,高原組與平原組個(gè)人口腔衛(wèi)生習(xí)慣及口腔保健均

9、無(wú)明顯差異(P>0.05);高原組牙齦出血發(fā)病率高達(dá)58.54％,BOP陽(yáng)性率36.13%,均明顯高于平原組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2、高原PH組和平原PH組個(gè)人口腔衛(wèi)生習(xí)慣優(yōu)于高原CP組和平原CP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高原CP組與平原CP組個(gè)人口腔衛(wèi)生習(xí)慣及口腔保健上均無(wú)顯著差異(P>0.05)。牙周臨床指標(biāo)方面,高原CP組的BOP陽(yáng)性率、PD、AL均高于高原PH組,平原CP組的BOP陽(yáng)性率、P

10、D、AL均高于平原PH組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高原CP組PD、AL均高于平原CP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3、經(jīng)雙向有序關(guān)聯(lián)檢驗(yàn)分析,高原地區(qū)慢性牙周炎患者唾液中PGE2水平隨著PD和AL等牙周臨床指數(shù)的增加而升高(P<0.05)。
　　4、高原地區(qū)受檢者唾液中牙周致病菌的檢測(cè)方面,Pg、Tf、Td、Aa、Pi和Fn在高原 CP組中的陽(yáng)性檢出率明顯高于高原 PH組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

11、5);Pg、Tf、Td、Aa、Pi和Fn在BOP(+)組中的陽(yáng)性檢出率明顯高于BOP(-)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)雙向有序關(guān)聯(lián)檢驗(yàn)分析,隨著PD和AL的增加,Pg、Tf、Td、Aa、Pi和Fn的陽(yáng)性檢出率均明顯升高(P<0.05)。
　　5、高原CP組、高原PH組、平原CP組、平原PH組的6種牙周致病菌陽(yáng)性檢出率在唾液樣本和齦下菌斑樣本中的均一性較高。唾液及齦下菌斑樣本中,高原 CP組Fn和Aa的陽(yáng)性檢出率均明顯高

12、于平原CP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、良好的個(gè)人口腔衛(wèi)生習(xí)慣及口腔保健是預(yù)防慢性牙周炎發(fā)生的主要因素之一。較平原地區(qū)居住人群而言,本次調(diào)查的高原地區(qū)居住人群的牙周健康狀況不理想,慢性牙周炎發(fā)病率更高。外在環(huán)境因素的改變可能是居住于高原地區(qū)人群的慢性牙周炎發(fā)病率高、病情重的重要原因。
　　2、高原地區(qū)慢性牙周炎患者唾液中PGE2水平與BOP、PD、AL等牙周臨床指標(biāo)呈正相關(guān)關(guān)系;高原地區(qū)慢