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文檔簡介
1、目的:通過成功建立大鼠視網(wǎng)膜紫外線光損傷模型來觀察光損傷中大鼠視網(wǎng)膜腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factorα, TNF-α)、白細胞介素-1β(interleukin1β,IL-1β)的表達情況,及預(yù)先使用烏司他?。╱linastatin,UTI)對TNF-α、IL-1β表達的影響,以探索烏司他丁對視網(wǎng)膜光損傷的保護作用及機制。
方法:選斯普拉-道來氏(Sprague-Dawley,SD)大鼠30只,均為
2、雌性,隨機分為正常對照組、光照對照組(紫外線光照)和光照實驗組(紫外線光照+烏司他丁藥),后兩組再分為光照3天、7天組,每組各6只大鼠(12只眼)。所有大鼠均在12小時明(30Lux-50Lux)12小時暗環(huán)境中飼養(yǎng)7天,然后暗適應(yīng)36小時。正常對照組暗適應(yīng)后不經(jīng)任何處理直接取標(biāo)本;光照對照組和光照實驗組每日經(jīng)光照強度為2200±138Lux的300-400nm中長波紫外線燈連續(xù)光照8小時(9:00—17:00)后送回暗室飼養(yǎng)。光照前3
3、天始,每日上午8:30給光照實驗組腹腔注射烏司他丁液1次(2萬U/Kg),用藥至取標(biāo)本當(dāng)日。三組均于預(yù)定的時間點取雙眼球,行蘇木素-伊紅染色(hematoxylin and eosin staining,HE),光鏡下觀察視網(wǎng)膜形態(tài)變化,免疫組織化學(xué)方法分析TNF-α和IL-1β表達變化,計算機圖像分析軟件(Image-Pro Plus,IPP)分析視網(wǎng)膜外核層(outer nuclear layer,ONL)厚度、TNF-α及IL-1
4、β表達情況。數(shù)據(jù)采用SPSS19.0 for Windows進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果:1、制備了理想的視網(wǎng)膜光損傷動物模型;2、正常對照組大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)正常,TNF-α與IL-1β未見陽性染色;3、光照對照組視網(wǎng)膜3天、7天組均出現(xiàn)病理性改變, ONL厚度、TNF-α及 IL-1β表達量和正常對照組相比較, P<0.01;4、實驗對照組視網(wǎng)膜3天、7天組出現(xiàn)病理性改變,較光照對照組損傷為輕,兩時間點 ONL厚度、TNF-α與IL-
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