上下呼吸道纖毛功能內在差異性的比較研究.pdf

1、目的:黏液纖毛清除功能(MCC)是呼吸系統(tǒng)抵抗環(huán)境中各種病原體、污染物侵襲的第一道防線。纖毛擺動作為MCC的動力來源,對維持MCC的正常功能起到了至關重要的作用,纖毛擺動機制的研究雖已開展多年,但對其了解仍遠未完善。臨床發(fā)現(xiàn)慢性鼻竇炎(CRS)可導致患者鼻腔MCC下降,但與此同時,CRS患者下呼吸道MCC存在異常的體征卻少有發(fā)現(xiàn)。這預示著上下呼吸道纖毛擺動功能可能存在著差異?；谝陨媳尘?本實驗對各種狀態(tài)下,上下呼吸道上皮纖毛的擺動功能

2、開展了比較研究,以期闡明:各種狀態(tài)下,上下呼吸道纖毛擺動功能是否存在差異;通過比較研究,為纖毛擺動機制的研究開辟新的途徑。
　　材料與方法:體外建立“Puff"系統(tǒng),模擬“噴嚏”這一生理過程。觀察“噴嚏”對小鼠鼻腔上皮CBF的影響。使用抑制劑(Apyrase、Suramin、EGTA、BAPTA-AM和H-89)干預實驗,研究ATP、鈣離子(Ca2+)和蛋白激酶A(PKA)在這一過程中的作用。觀察“噴嚏”后,鼻腔、氣管上皮CBF反

3、應性的差異。觀察上下呼吸道上皮細胞基礎狀態(tài)下CBF的差異,使用fura-2測定兩種上皮細胞中的Ca2+濃度。觀察綠膿桿菌分泌液對鼻腔、氣管上皮細胞基礎CBF和“噴嚏”后CBF反應性的影響,并且,利用細菌分泌液對鼻腔、氣管上皮細胞進行預處理后,觀察活體綠膿桿菌在上下呼吸道上皮表面附著能力的差異。
　　結果:“噴嚏”后鼻腔上皮CBF與“噴嚏”前CBF的比率為1.78±0.05,n=10,ATP、Ca2+以及PKA抑制劑可明顯抑制這一反

4、應。氣管組中,“噴嚏”后CBF的升高比率僅為1.21±0.03,n=10,p＜0.01。氣管上皮基礎CBF約為鼻腔上皮基礎CBF的兩倍。氣管纖毛細胞內Ca2+濃度為91.06±9.85nM,n=4,鼻腔組中這一數(shù)據為54.90±2.52nM,n=4,p＜0.05。綠膿桿菌分泌物在降低鼻腔上皮細胞基礎CBF的同時,也能夠抑制“噴嚏”后CBF的升高;氣管上皮CBF對綠膿桿菌分泌物的侵襲則具有抵抗力。鼻腔上皮細胞上細菌的貼敷數(shù)量在實驗組及對照