迷走神經(jīng)刺激對大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)的影響及其機制探討.pdf

1、第一部分大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型的建立及電生理、病理學觀察
　　目的：建立大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型，觀察大鼠行為學和腦電圖改變，組織病理學觀察癲癇持續(xù)狀態(tài)引起的海馬神經(jīng)元損傷。
　　方法：雄性Wistar大鼠隨機分為SE組與對照組，每組各12只，均行腦電記錄電極植入，術后恢復1周。SE組大鼠腹腔注射氯化鋰-匹魯卡品誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)，觀察大鼠行為學及腦電活動變化，癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作60min后用地西泮終止發(fā)作，72h后灌注取腦切片，Ni

2、ssl染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元的損傷情況。對照組大鼠用等量生理鹽水代替匹魯卡品腹腔注射，余處理同SE組。
　　結(jié)果：SE組有11只大鼠成功誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)，其腦電圖表現(xiàn)為叢集性棘波放電，而對照組大鼠均無癲癇發(fā)作，腦電圖表現(xiàn)正常；Nissl染色顯示：SE組大鼠海馬區(qū)部分神經(jīng)元稀疏，排列紊亂，核固縮，胞漿尼氏小體減少，而對照組大鼠海馬神經(jīng)元致密，胞核正常，胞漿尼氏小體豐富。
　　結(jié)論：氯化鋰-匹魯卡品可誘發(fā)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)并伴有海

3、馬神經(jīng)元損傷。
　　第二部分迷走神經(jīng)刺激對癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠行為學、電生理影響及對海馬神經(jīng)元的保護作用
　　目的：在氯化鋰-匹魯卡品誘發(fā)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型中，探討迷走神經(jīng)刺激對癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠行為學、電生理學的影響及對海馬神經(jīng)元的保護作用。
　　方法：雄性Wistar大鼠隨機分為四組：A組（VNS預處理組），注射匹魯卡品前2h開始VNS電刺激；B組（VNS治療組），注射匹魯卡品后開始VNS電刺激；C組（假刺激組），僅行

4、VNS電極植入，不予電刺激；D組（空白對照組），生理鹽水代替匹魯卡品；每組各12只。采用氯化鋰-匹魯卡品腹腔注射誘發(fā)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)，VNS刺激參數(shù)：頻率30Hz，波寬500μs，電流1mA，刺激時間30s，間隔30s。觀察比較各組大鼠行為學及腦電圖變化，72h后腦組織切片觀察各組海馬齒狀回Caspase-3表達含量變化。
　　結(jié)果：
　?。?）A組大鼠Ⅳ、Ⅴ級發(fā)作持續(xù)時間（274.1±58.5s、69.5±27.1s），B

5、組Ⅳ、Ⅴ級發(fā)作持續(xù)時間（265.5±56.6s、111±38.2s）均較C組（403.1±105.6s、165.0±48.1s）縮短，P＜0.05；A組大鼠Ⅴ級發(fā)作持續(xù)時間較B組縮短，P＜0.05；A組大鼠SE潛伏期（31.2±2.2min）較B、C組（28.6±1.2min、27.1±1.8min）均延長，P＜0.05；D組大鼠未見癲癇發(fā)作。
　?。?）A、B兩組大鼠海馬齒狀回Caspase-3表達量（5854.7±856.5，

6、6244.8±806.0）少于C組（11957±1948.0），P＜0.05。A、B兩組間無明顯差異，（P＞0.05）。D組Caspase-3表達最少（1521±287），顯著少于其他各組，P＜0.05。
　　結(jié)論：
　　VNS能夠使癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠行為學表現(xiàn)得到改善，且 VNS預處理效果優(yōu)于治療性VNS刺激；VNS能夠減少癲癇持續(xù)狀態(tài)導致的海馬神經(jīng)元早期凋亡，對海馬神經(jīng)元有保護作用。
　　第三部分迷走神經(jīng)刺激干預大鼠

7、癲癇持續(xù)狀態(tài)作用機制的探討
　　目的：在氯化鋰-匹魯卡品誘發(fā)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型中探討 VNS干預癲癇持續(xù)狀態(tài)的作用機制。
　　方法：雄性Wistar大鼠隨機分為四組：A組（VNS預處理組），注射匹魯卡品前2h開始VNS電刺激；B組（VNS治療組），注射匹魯卡品后開始VNS電刺激；C組（假刺激組），僅行VNS電極植入，不予電刺激；D組（空白對照組），生理鹽水代替匹魯卡品；每組各12只。采用氯化鋰-匹魯卡品腹腔注射誘發(fā)大鼠癲癇

8、持續(xù)狀態(tài)，VNS刺激參數(shù)：頻率30Hz，波寬500μs，電流1mA，刺激時間30s，間隔30s。注射匹魯卡品2h后腹腔注射地西泮終止，72h后腦組織切片免疫熒光檢測各組大鼠海馬齒狀回GABAA受體表達含量變化。
　　結(jié)果：A、B兩組大鼠海馬GABAA受體表達量（11024.2±2080.1,9798.2.0±1524.3）顯著多于C組（7605.4±1470.8），P＜0.05。A、B兩組間無明顯差異（P＞0.05）。D組大鼠海馬